|
|
| Κωδικός Πόρου |
000374654 |
| Τίτλος |
Ανάλυση του μονοπατιού βιογένεσης της HDL με μεταλλαξιογένεση της απολιποπρωτείνης Α-I |
| Άλλος τίτλος |
Analysis of the pathway of biogenesis of HDL by mutatios of apolipoprotein A-I |
|
Συγγραφέας
|
Κατεϊφίδης, Ανδρέας
|
|
Σύμβουλος διατριβής
|
Καρδάσης, Δημήτριος
|
|
Μέλος κριτικής επιτροπής
|
Ζαννής, Βασίλειος
Ηλιόπουλος, Αριστείδης
Θερμού, Κυριακή
Παπαδάκη, Ελένη
Μπούμπας, Δημήτριος
Σουρβίνος, Γεώργιος
|
| Περίληψη |
Α-Ι είναι σημαντική για την βιογένεση της λιποπρωτεϊνης υψηλής πυκνότητας (HDL) και προστατεύει από την αθηροσκλήρωση. Μεταλλάξεις στην αποΑ-Ι σχετίζονται με Η απολιποπρωτεϊνη χαμηλά επίπεδα HDL στο πλάσμα και προδιάθεση για αθηροσκλήρωση. Ο σκοπός της παρούσας διατριβής ήταν να διερευνηθεί η σχέση δομής-λειτουργίας της αποΑ-Ι του ανθρώπου και ο ρόλος συγκεκριμένων αμινοξέων της αποΑ-Ι στην βιογένεση και την ωρίμανση της HDL. H διατριβή χωρίζεται σε δυο μέρη.
Μέρος Ι: Μεταλλαξιογένεση των αρνητικά φορτισμένων αμινοξέων στην περιοχή 89 με 99 της απολιποπρωτεϊνης Α-Ι επηρεάζει την ομοιόσταση των λιπιδίων και την ωρίμανση της HDL. (J Lipid Res. 2011 Jul;52(7):1363-72). Γονιδιακή μεταφορά σε ποντίκια με ανεπάρκεια της αποΑ-Ι (αποΑ-Ι-/-) έδειξε ότι η μετάλλαξη αποΑ-Ι[D89Α/Ε91Α/Ε92Α] αύξησε τα επίπεδα χοληστερόλης του πλάσματος και προκάλεσε σοβαρή υπερτριγλυκεριδεμία. Τα επίπεδα της HDL μειώθηκαν και περίπου 40% της αποΑ-Ι μετατοπίστηκε στη περιοχή της LDL/IDL. Το κλάσμα της HDL περιείχε ως επί το πλείστον σφαιρικά σωματιδία καθώς και μερικά δισκοϊδή και το πλάσμα περιείχε preβI και α4 υποπληθυσμούς της HDL. Η μεταλλαγμένη πρωτεΐνη είχε αυξημένη συγγένεια σε γαλακτώματα πλούσια σε τριγλυκερίδια. Τα επίπεδα λιπιδίων και λιποπρωτεϊνών καθώς και το προφίλ της HDL της αποΑ-Ι[Κ94Α/Κ96Α] ήταν παρόμοια αλλά όχι ίδια με αυτά της αποΑ-Ι αγρίου τύπου. Ταυτόχρονη έκφραση αποΑ-Ι[D89Α/Ε91Α/Ε92Α] και ανθρώπινης λιποπροτεϊνικής λιπάσης διόρθωσε την υπερτριγλυκεριδαιμία, διόρθωσε εν μέρει τους α1,2,3,4 υποπληθυσμούς της HDL, επανέφερε την αποΑ-Ι στις HDL2/HDL3 περιοχές, αλλά δεν απέτρεψε τον σχηματισμό δισκοϊδών σωματιδίων. Συμπερασματικά, τα αμινοξέα D89, Ε91 και Ε92 της αποΑ-Ι είναι σημαντικά για τα επίπεδα της χοληστερόλης στο πλασμα και την ομοιόσταση των τριγλυκεριδίων καθώς και για την ωρίμανση της HDL.
Μέρος ΙΙ: Συμβολή των αμινοξέων 218 εώς 226 του γονιδίου της απολιποπροτεϊνης Α-Ι στη βιογένεση της HDL. Γονιδιακή μεταφορά με χρήση αδενοϊών της αποΑ-Ι[L218A/L219A/V221A/L222A] σε αποΑ-Ι-/- ποντίκια οδήγησε σε σχεδόν αξαφάνιση της HDL, μείωση κατά περίπου 90% στα επίπεδα της χοληστερόλης και της αποΑ-Ι στο πλάσμα συγκριτικά με τα ποντίκια που εκφράζουν την αποΑ-Ι αγρίου τύπου καθώς και στο σχηματισμό preβ και α4-HDL σωματιδίων. Ανάλυση με ηλεκτροφόρηση δύο διαστάσεων και με ηλεκτρονική μικροσκοπία έδειξαν ότι η μεταλλαγμένη αποΑ-Ι[L218A/L219A/V221A/L222A] μορφή δεν μπορεί να σχηματίσει HDL σωματίδια όταν εκφραστεί σε αποΑ-Ι-/- x αποΕ-/- ποντίκια.
Η μεταλλαγμένη αποΑ-Ι[E223A/K226A] μορφή είχε παρόμοια επίπεδα αποΑ-Ι στο πλάσμα και είχε παρόμοια αλλά όχι ταυτόσημα προφίλ λιπιδίων και λιποπρωτεϊνών με την αποΑ-Ι αγρίου τύπου. Συμπεραίνουμε ότι κρίσιμες αλλαγές στα υδρόφοβα αμινοξέα 218-222 του C-τερματικού άκρου της αποΑ-Ι επηρεάζουν σημαντικά τις αλληλεπιδράσεις της αποΑ-Ι με την ABCA1 ή/και την LCAT και αναστέλουν την βιογένεση της HDL.
Στα πλαίσια της παρούσης διατριβής, μελετήσαμε σε συνεργασία με άλλες ερευνητικές ομάδες τον ρόλο του καρβοξυτερματικού άκρου της αποΑ-Ι στην τρανσ-ενδοκύττωση της HDL από ενδοθηλιακά κύτταρα (J Biol Chem. 2011 Mar 11;286(10):7744-54), την αντιβακτηριδιακή δράση της αποΑ-Ι απέναντι στο βακτήριο the Yersinia enterocolitica ορότυπος 0:3 (manuscript in preparation) και ο ρόλος μεταλλάξεων στην αποΑ-Ι σε ασθενείς με αυξημένο κίνδυνο για καρδιοπάθεια στον πληθυσμό της Κοπεγχάγης (J Intern Med. 2011 Mar 28. doi: 10.1111 in press).
|
| Φυσική περιγραφή |
xx, 224 σ : πιν. ; 25 εκ. |
| Γλώσσα |
Ελληνικά |
| Θέμα |
Apolipoprotein AI |
|
Biochemistry |
|
Gene transfer |
|
HDL |
|
Mutagenesis |
|
Απολιποπρωτεϊνη Α-I |
|
Μεταλλαξιογένεση |
|
Ορθοκολικός καρκίνος |
| Ημερομηνία έκδοσης |
2011 |
| Συλλογή
|
Σχολή/Τμήμα--Ιατρική Σχολή--Τμήμα Ιατρικής--Διδακτορικές διατριβές
|
|
|
Τύπος Εργασίας--Διδακτορικές διατριβές
|
| Εμφανίσεις |
293 |
Ανάλυση του μονοπατιού βιογένεσης της HDL με μεταλλαξιογένεση της απολιποπρωτείνης Α-I
