Your browser does not support JavaScript!

Αρχική    Μελέτη των πρωτεϊνών του εκκριτικού συστήματος τύπου IV της Coxiella Burnetii  

Αποτελέσματα - Λεπτομέρειες

Προσθήκη στο καλάθι
[Προσθήκη στο καλάθι]
Κωδικός Πόρου 000403907
Τίτλος Μελέτη των πρωτεϊνών του εκκριτικού συστήματος τύπου IV της Coxiella Burnetii
Άλλος τίτλος Study of proteins of the secretion system type IV of Coxiella Burnetii
Συγγραφέας Μαθιουδάκη, Ειρήνη Κ.
Σύμβουλος διατριβής Τσιώτης, Γεώργιος
Μέλος κριτικής επιτροπής Γανωτάκης, Δημήτριος
Ψαρουλάκη, Άννα
Περίληψη Η Coxiella burnetii είναι ένα υποχρεωτικά ενδοκυττάριο βακτήριο, το οποίο προκαλεί τον πυρετό Q στον άνθρωπο και σε άλλα θηλαστικά ζώα. Μελέτες στο συγκεκριμένο βακτήριο έχουν δείξει πως, για την επιβίωση και τον πολλαπλασιασμό του στο κύτταρο ξενιστή, εξειδικευμένες μοριακές μηχανές συμβάλουν μέσω μεταφοράς συγκεκριμένων πρωτεϊνικών μορίων, τα οποία επεμβαίνουν στις κυτταρικές διεργασίες του ξενιστή με αποτέλεσμα την εγκαθίδρυση της μόλυνσης. Μία τέτοια μοριακή μηχανή είναι το εκκριτικό σύστημα τύπου IVB (T4BSS), γνωστό και ως σύστημα Dot/Icm, που μεταφέρει πρωτεΐνες από το βακτήριο στη κύτταρο ξενιστή. Το συγκεκριμένο εκκριτικό σύστημα έχει μελετηθεί σε βάθος στο βακτήριο Legionella pneumophilia και έχει βρεθεί πως απαρτίζεται από 27 πρωτεΐνες, 24 από τις οποίες ταυτοποιούνται σε στέλεχος της C.burnetii. Στην συγκεκριμένη εργασία, μελετώνται 4 πρωτεΐνες από το εκκριτικό σύστημα T4BSS της C.burnetii, όπως επίσης και το υποσύμπλοκο του πυρήνα που απαρτίζεται από τις DotC, DotD, IcmG (DotF), IcmE (DotG) και IcmK (DotH). Οι πρωτεΐνες που μελετώνται είναι η IcmK της εξωτερικής μεμβράνης, η IcmE του περιπλάσματος, η DotC και η DotD. Αρχικά, ελέγχθηκε η ικανότητα έκφρασης των παραπάνω πρωτεϊνών στα στελέχη E.Coli C43(DE3) χρησιμοποιώντας τους πλασμιδιακούς φορείς pttQ18A2 και pttQ18C3. Ο πρώτος πλασμιδιακός φορέας έφερε το γονίδιο της εκάστοτε πρωτεΐνης με σήμανση την ουρά 6 ιστιδινών στο κάρβοξυ-τελικό άκρο, ενώ ο δεύτερος έφερε ως σήμανση ένα μικρό πεπτίδιο 8 αμινοξέων (Trp-Ser-His-Pro-Gln-Phe-Glu-Lys), που ονομάζεται strep-tag, επίσης στο κάρβοξυ- τελικό άκρο της αμινοξικής αλληλουχίας της πρωτεΐνης. Με τον τρόπο αυτό, ήταν εφικτή η απομόνωση της εκάστοτε πρωτεΐνης με χρωματογραφία συγγενείας και πιο συγκεκριμένα με τη χρήση στήλης νικελίου και στρεπταβιδίνης, για κάθε μία από τις παραπάνω περιπτώσεις αντίστοιχα. Στη συνέχεια, ακολούθησε καθαρισμός της πρωτεΐνης στόχου με χρωματογραφία μοριακού αποκλεισμού. Η επιτυχής απομόνωση,ο καθαρισμός και η ταυτοποίηση των επιθυμητών πρωτεϊνών με φασματομετρία μάζας, ανοίγει τον δρόμο για το δομικό τους χαρακτηρισμό με την μέθοδο της ηλεκτρονικής μικροσκοπίας ή της κρυσταλλογραφίας. Η μελέτη των εκκρινόμενων πρωτεϊνών του παθογόνου βακτηρίου Coxiella burnetii έχει πολύ μεγάλη σημασία με ενδεχόμενες εφαρμογές στην ιατρική, δεδομένου πως τα συγκεκριμένα πρωτεϊνικά μόρια συμβάλουν στην ανάπτυξη του βακτηρίου μέσα στο κύτταρο ξενιστή, αποτελώντας μόρια-στόχους για την ανάπτυξη φαρμάκων.
Φυσική περιγραφή 147 σ. : πίν., εικ. (μερ. εγχρ.) ; 30 εκ.
Γλώσσα Ελληνικά
Θέμα Affinity chromatography
Electrophoresis
IVB secretorion system
Mass spectrometry
Membrane proteins
Molecular exclusion chromatography
Q fever
Εκκριτικό σύστημα τύπου IVB
Ηλεκτροφόρηση
Μεμβρανικές πρωτεΐνες
Πυρετός Q
Φασματομετρία μάζας
Χρωματογραφία μοριακού αποκλεισμού
Χρωματογραφία συγγένειας
Ημερομηνία έκδοσης 2016-11-18
Συλλογή   Σχολή/Τμήμα--Σχολή Θετικών και Τεχνολογικών Επιστημών--Τμήμα Χημείας--Μεταπτυχιακές εργασίες ειδίκευσης
  Τύπος Εργασίας--Μεταπτυχιακές εργασίες ειδίκευσης
Εμφανίσεις 40

Ψηφιακά τεκμήρια
No preview available

Προβολή Εγγράφου
Εμφανίσεις : 15