| Περίληψη |
Στην εξωσωματική γονιμοποίηση η επιλογή των καταλληλότερων εμβρύων είναι απαραίτητη για την επιτυχή εμφύτευση και την επικείμενη εγκυμοσύνη. Πολλά ζευγάρια αναγκάζονται σε πολλαπλές δοκιμές λόγω της υποκειμενικής μικροσκοπικής επιλογής των εμβρύων αφού ένα γενετικά υγειές έμβρυο δεν είναι αναγκαία ικανό για εμφύτευση. Ως εκ τούτου, η ανάπτυξη μιας τεχνικής απεικόνισης που θα εξετάζει την λειτουργικότητα και θα αξιολογεί την υγεία των εμβρύων απαιτείται προκειμένου να βελτιωθεί η επιλογή εμβρύων πριν από την εμφύτευση.
Η μικροσκοπία γένεσης τρίτης αρμονικής (THG) είναι μια νέα μη επεμβατική τεχνική απεικόνισης η οποία απαιτεί ελάχιστη προετοιμασία των δειγμάτων και καμία χρώση και θα μπορούσε να χρησιμοποιηθεί επιτυχώς για την επιλογή εμβρύων και την παρακολούθηση τους κατά τη διάρκεια της διαδικασίας γονιμοποίησης in vitro. Η χρήση της μικροσκοπίας THG έχει προσφέρει πολύτιμες και συμπληρωματικές πληροφορίες ως προς την ενεργειακή κατάσταση των ωαρίων και των εμβρύων πριν από την εμφύτευση, την χρονική εξέλιξη των διαφόρων σταδίων ανάπτυξης καθώς και την εν δυνάμει ισοδυναμία των βλαστομεριδίων του εμβρύου. Επιπλέον, η ποσοτικοποίηση του σήματος THG θα μπορούσε να επιτρέψει την παράδοση μιας αντικειμενικής αριθμητικής τιμής σε κάθε ωοκύτταρο ή έμβρυο η οποία να αντικατοπτρίζει την περιεκτικότητα του σε λιπιδικά κυστίδια και, κατά συνέπεια θα συσχετίζεται με την ενεργειακή τους κατάσταση
Η εν λόγω μεθοδολογία θα μπορούσε να προσφέρει στα κέντρα εξωσωματικής γονιμοποίησης ένα νέο διαγνωστικό εργαλείο με σκοπό την αύξηση των ποσοστών επιτυχών κυήσεων.
Στην παρούσα μελέτη συνεχίσαμε την διερεύνηση του ρόλου του ενεργειακού προφίλ των προεμφυτευτικών εμβρύων, με την μελέτη της επίδρασης της L-καρνιτίνης στα έμβρυα ποντικών. Η L-καρνιτίνη είναι ένα μικρό μόριο απαραίτητο για τη μεταφορά λιπαρών οξέων από το κυτταρόπλασμα στα μιτοχόνδρια με σκοπό τον καταβολισμό τους και την παραγωγή ενέργειας για το κύτταρο
Η L-καρνιτινη χορηγήθηκε ενέσιμα σε BALB/c θυληκα ποντίκια 4ων εως 12 εβδομάδων. Θεραπεία με L-καρνιτίνη για 4 και 5 μέρες φαινεται να μην έχει κάποια σημαντική επίδραση όμως στις 7 μέρες παρατηρούμε, μεταξύ άλλων, αλλαγές στο σήμα της τρίτης αρμονικής. Ενώ δεν υπάρχει διαφορά στον όγκο των λιπιδικών κυστιδίων , εμφανίζονται συσσωματωματα των δομών αυτών ενώ παράλληλα παρά την ύπαρξη γονιμοποιημένων εμβρύων μέχρι και το στάδιο της βλαστοκύστης στην 3η μέρα, οι εγκυμοσύνες δεν ολοκληρώθηκαν.
Αυτά τα ευρήματα υποδεικνύουν τη σημασία των λιπιδικών κυστιδίων στο αναπτυσσόμενο προεμφυτευτικό έμβρυο και αναδεικνύουν την χρησιμότητα της THG μικροσκοπίας ως ένα νέο, χρήσιμο διαγνωστικό εργαλείο για την αξιολόγηση της ποιότητας των προεμφυτευτικών εμβρύων και την βελτίωση των αποτελεσμάτων της υποβοηθούμενης αναπαραγωγής.
|
Απεικόνιση προεμφυτευτικών εμβρύων ποντικών μέσω καταγραφής σημάτων γένεσης τρίτης αρμονικής
