| Περίληψη |
Η 15-λιποξυγενάση-1 (15-LOX-1) αποτελεί ένα από τα βασικά ένζυμα στα
κύτταρα των θηλαστικών. Η κύρια δράση του ενζύμου είναι κυρίως η εμπλοκή του
στον μεταβολισμό των λιπιδίων. Εντοπίζεται κυρίως στο κυτταρόπλασμα του
ανοσοποιητικού συστήματος και των επιθηλιακών κυττάρων και στοχεύει σε
πολυακόρεστα λιπαρά οξέα όπως το αραχιδονικό και το λινολεϊκό οξύ, καταλύοντας
την διοξυγόνωση των λιπαρών οξέων στη 15η θέση άνθρακα, παράγοντας τα
αντίστοιχα υδροϋπεοξείδια τους. Η σημασία της 15- LOX-1 εκτείνεται σε διάφορες
φυσιολογικές και παθολογικές διεργασίες, συμπεριλαμβανομένων των φλεγμονών,
της αθηροσκλήρωσης, του καρκίνου και των νευροεκφυλιστικών ασθενειών.
Συνολικά, η 15-λιποξυγενάση-1 χαρακτηρίζεται ως ένα πολύπλευρο, σημαντικό
ένζυμο, καθιστώντας το έτσι πρωταρχικό στόχο για θεραπευτικές παρεμβάσεις σε
διαφορετικές παθήσεις. Στη συγκεκριμένη πτυχιακή εργασία, παρουσιάζεται αρχικά η
διαδικασία ετερόλογης έκφρασης και καθαρισμού του ενζύμου και μετέπειτα
εξετάζεται η ικανότητα υδρόλυσης του ΑΤΡ παράγοντας ADP και ορθοφωσφορικό
(Pi). Αφού διαπιστώθηκε η υδρόλυση ΑΤΡ από το ένζυμο, εξετάστηκαν παράγοντες
που πιθανώς επηρεάζουν το ποσοστό υδρόλυσης, όπως διαφορετικές θερμοκρασίες
επώασης. Έπειτα, διερευνήθηκε η αναστολή της καταλυτικής υδρόλυσης ΑΤΡ και η
εξάρτηση της υδρόλυσης ΑΤΡ με τον έναν από αυτούς τους αναστολείς. Παράλληλα,
μελετήθηκε η αντίδραση υδρόλυσης ΑΤΡ από το ένζυμο, υπό την συνύπαρξη τόσο
του υποστρώματος του ενζύμου όσο και ενός συναγωνιστικού αναστολέα. Επιπλέον,
μελετήθηκε αν το ένζυμο έχει την ικανότητα να υδρολύει περαιτέρω το ATP σε ADP,
αλλά και το πώς επηρεάζει την υδρόλυση το προϊόν της υπεροξείδωσης του
λινολεϊκού. Τέλος, πραγματοποιήθηκε έκφραση και καθαρισμός ενός μεταλλάγματος
του ενζύμου, με σκοπό να παρατηρηθεί αν και αυτό έχει την ικανότητα να υδρολύει
ATP.
|
Αλλοστερική ρύθμιση της δράσης ATPασης της 15 Λιποξυγενάσης -1 από τα φυσικά της υποστρώματα
