Your browser does not support JavaScript!

Αρχική    Μέτρηση του ρυθμού πρωτεϊνοσύνθεσης σε κυτταροειδικό και ιστοειδικό επίπεδο, σε ζωντανούς νηματώδεις Caenorhabditis elegans. Μέρος Β: Λειτουργικός χαρακτηρισμός ενός μέλους της οικογένειας των DEG/ENaCs, στο νηματώδη Caenorhabditis elegans  

Αποτελέσματα - Λεπτομέρειες

Προσθήκη στο καλάθι
[Προσθήκη στο καλάθι]
Κωδικός Πόρου uch.biology.msc//2007kourtis
Τίτλος Μέτρηση του ρυθμού πρωτεϊνοσύνθεσης σε κυτταροειδικό και ιστοειδικό επίπεδο, σε ζωντανούς νηματώδεις Caenorhabditis elegans. Μέρος Β: Λειτουργικός χαρακτηρισμός ενός μέλους της οικογένειας των DEG/ENaCs, στο νηματώδη Caenorhabditis elegans
Συγγραφέας Κούρτης, Νίκος
Περίληψη Μέρος Α. Οι διαθέσιμες μεθοδολογίες για τη μέτρηση του ρυθμού πρωτεϊνοσύνθεσης στηρίζονται στην ενσωμάτωση ραδιοσημασμένων αμινοξέων στις νεοσυντιθέμενες πολυπεπτιδικές αλυσίδες. Η χρήση αυτής της μεθόδου έχει αρκετούς περιορισμούς και δεν μπορεί να χρησιμοποιηθεί για την καταγραφή της πρωτεϊνοσύνθεσης σε συγκεκριμένα κύτταρα και ιστούς, σε ζωντανούς οργανισμούς. Στην παρούσα εργασία προσπαθήσαμε να ξεπεράσουμε τις παραπάνω δυσκολίες και καθιερώσαμε μια νέα μέθοδο για τη μέτρηση της πρωτεϊνοσύνθεσης σε επιλεγμένα κύτταρα και ιστούς ζωντανών νηματωδών C. elegans. Φθορίζουσες πρωτεΐνες όπως η GFP εκφράζονται με τη χρήση κατάλληλων υποκινητών σε κύτταρα/ιστούς που μας ενδιαφέρουν ή ακόμα και σε ολόκληρο το σώμα του ζώου. Η καταγραφή του ρυθμού πρωτεϊνοσύνθεσης στηρίζεται στην αναγέννηση του φθορισμού ύστερα από φωτο-απενεργοποίηση της GFP με τη χρήση φωτός υψηλής ενέργειας και κατάλληλου μήκους κύματος (Fluorescence Recovery After Photobleaching - FRAP). Για την αξιολόγηση της δυναμικής της μεθόδου μελετήσαμε τους ρυθμούς πρωτεϊνοσύνθεσης σε διαφόρους κυτταρικούς τύπους του νηματώδους. H μέθοδος αυτή επιτρέπει την καταγραφή του ρυθμού παραγωγής πρωτεϊνών, σε συγκεκριμένα κύτταρα και ιστούς ζωντανών δειγμάτων που παρουσιάζουν διαφορετικό ενδογενή ρυθμό πρωτεϊνοσύνθεσης. Μέρος Β. Κοινό χαρακτηριστικό οργανισμών με μεγάλη μεταξύ τους φυλογενετική απόσταση όπως ο άνθρωπος, το σκουλήκι, η μύγα, ο αχινός και η ύδρα, είναι η ύπαρξη πρωτεϊνών που ανήκουν στην οικογένεια των Degenerins, και σχηματίζουν πόρους στην κυτταρική μεμβράνη για το πέρασμα ιόντων νατρίου. Μέλη της οικογένειας αυτής συμμετέχουν σε ποικίλες λειτουργίες όπως η αντίληψη πρωτονίων (ASICs), η μηχανοαίσθηση (DEGs), η ενεργοποίηση από νευροπεπτίδια (FaNaChs) και στη ρύθμιση της ομοιόστασης του νατρίου (ENaCs). Στη διάρκεια της παρούσης εργασίας επιχειρήθηκε ο χαρακτηρισμός ενός μέλους της οικογένειας των Degenerins και συγκεκριμένα του γονιδίου T28B8.5. Ο χαρακτηρισμός του προτύπου έκφρασης, έδειξε ότι το γονίδιο αυτό εκφράζεται σε νευρώνες υπεύθυνους για την αντίληψη χημικών ερεθισμάτων καθώς και σε νευρώνες άγνωστης λειτουργίας. Στη συνέχεια, στελέχη ομόζυγα για μεταλλαγές στο παραπάνω γονίδιο, εξετάστηκαν σε πειράματα συμπεριφοράς, με στόχο το λειτουργικό χαρακτηρισμό του γονιδίου .
Γλώσσα Ελληνικά
Ημερομηνία έκδοσης 2007-11-28
Συλλογή   Σχολή/Τμήμα--Σχολή Θετικών και Τεχνολογικών Επιστημών--Τμήμα Βιολογίας--Μεταπτυχιακές εργασίες ειδίκευσης
  Τύπος Εργασίας--Μεταπτυχιακές εργασίες ειδίκευσης
Εμφανίσεις 60

Ψηφιακά τεκμήρια
No preview available

Προβολή Εγγράφου
Εμφανίσεις : 1