| Περίληψη |
Η Μηχανική Ιστών ενσωματώνει τη χρήση καινοτόμων βιοϋλικών στοχεύοντας στην επιδιόρθωση της λειτουργίας ή την ανακατασκευή ιστών/οργάνων. Τα υλικά με βάση το γραφένιο (GBMs) έχουν προσελκύσει τεράστιο ενδιαφέρον λόγω της μοναδικής δομής και των ιδιαίτερων ιδιοτήτων τους, ωστόσο, έχει εκφραστεί ανησυχία για τις πιθανές δυσμενείς επιπτώσεις τους. Ως εκ τούτου, είναι υψίστης σημασίας να πραγματοποιηθεί αξιολόγηση των αλληλεπιδράσεων κυττάρου-γραφενίου, καθώς και των υποκείμενων μηχανισμών, προκειμένου να διευκολυνθεί η σωστή ανάπτυξη και χρήση τους για βιοϊατρικές εφαρμογές.
Σε αυτή τη διατριβή, μελετήσαμε δύο υλικά που έχουν ως βάση το γραφένιο – το οξείδιο γραφενίου (GO) και το ανηγμένο οξείδιο γραφενίου (rGO) - και την επίδρασή τους στα μεσεγχυματικά βλαστοκύτταρα (MSCs), μια πολυδύναμη κυτταρική σειρά που χρησιμοποιείται ευρέως σε εφαρμογές μηχανικής ιστών. Εστιάσαμε στο αν η παρουσία αυτών των δύο υλικών ενεργοποιεί την απόκριση του κυτταρικού οξειδωτικού στρες, ένα πανταχού παρόν φαινόμενο που σχετίζεται με διαταραχές στη φυσιολογική οξειδοαναγωγική κατάσταση των κυττάρων. Για τον προσδιορισμό της τοξικότητας του γραφενίου, πραγματοποιήθηκαν δοκιμασίες κυτταροτοξικότητας και πολλαπλασιασμού σε κυτταροκαλλιέργειες για διαφορετικές συγκεντρώσεις GO και rGO. Ο εντοπισμός των σημαντικών μεταγραφικών παραγόντων που σχετίζονται με την απόκριση του οξειδωτικού στρες αξιολογήθηκε μέσω ανοσοφθορισμού χρώσης και συνεστιακής μικροσκοπίας. Τα πρότυπα έκφρασης των γονιδίων που κωδικοποιούν πρωτεΐνες των συστημάτων κυτταρικής αντιοξειδωτικής δράσης - γλουταροξίνης και θειορεδοξίνης - μελετήθηκαν επίσης και αναλύθηκαν μέσω της ποσοτικής αλυσιδωτής αντίδρασης της πολυμεράσης με αντίστροφη μεταγραφάση (q RT-PCR), για να ανιχνευθούν πιθανές εναλλαγές στην έκφραση του mRNA που προκαλούνται από την έκθεση των κυττάρων σε GO και rGO. Στην παρούσα εργασία, μπορέσαμε να προσδιορίσουμε ότι τόσο το GO όσο και το rGO επηρεάζουν τις κυτταρικές αποκρίσεις συναρτήσει της συγκέντρωσης/δόσης του υλικού.
|
In vitro investigation of the cellular mechanisms activated by GO and rGO in Mesenchymal Stwm Cells (MSCs)
