| Περίληψη |
Οι γέφυρες χρωματίνης είναι νήματα DNA τα οποία ενώνουν τους
θυγατρικούς πυρήνες κατά το τέλος της κυτταροκίνησης και, εάν δεν επιλυθούν,
μπορούν να σπάσουν προκαλώντας χρωμοσωμική αστάθεια. Παρουσία γεφυρών
χρωματίνης ενεργοποιείται το abscission checkpoint το οποίο καθυστερεί το
τελικό κόψιμο του κυτταροπλάσματος, για να μη σπάσουν οι γέφυρες
χρωματίνης. Ακόμη, εκατέρωθεν των χρωματινικών γεφυρών σχηματίζονται
δομές ακτίνης (actin patches), οι οποίες στα φυσιολογικά κύτταρα σταθεροποιούν
τις γέφυρες DNA έως ότου αυτές επιλυθούν. Ωστόσο, ο μηχανισμός δημιουργίας
των actin patches δεν έχει ακόμα βρεθεί. Η πρωτεϊνική κινάση τυροσίνης Src,
συμμετέχει στην αναδιοργάνωση του κυτταροσκελετού. Στην παρούσα μελέτη,
δείξαμε ότι αναστολή της Src σε κύτταρα ανθρώπου οδηγεί σε αύξηση του
ποσοστού των σπασμένων γεφυρών DNA στην κυτταροκίνηση και αύξηση του
ποσοστού των κυττάρων με μικροπυρήνες. Ωστόσο, το σπάσιμο των γεφυρών
DNA σε κύτταρα χωρίς λειτουργική Chk1 ή Src συσχετίζεται με απώλεια των
actin patches στις βάσεις των γεφυρών DNA και όχι με δυσλειτουργία του
abscission checkpoint. Η ενεργοποιημένη πρωτεΐνη Src εντοπίζεται στα actin
patches, στις βάσεις των γεφυρών DNA στην κυτταροκίνηση. Επίσης, μείωση της
κινάσης Chk1 οδηγεί σε μείωση της ενεργότητας της πρωτεΐνης Src, απώλεια των
actin patches και αύξηση του ποσοστού των σπασμένων γεφυρών DNA στην
κυτταροκίνηση. Ακόμη, δείξαμε ότι η Chk1 φωσφορυλιώνει την πρωτεΐνη Src σε
μία νέα θέση, τη Σερίνη 51 και ότι η φωσφορυλιωμένη Src στη Σερίνη 51
εντοπίζεται στις βάσεις των γεφυρών DNA, την κυτταρική μεμβράνη και τον
πυρήνα. Η φωσφορυλίωση της Src στη Σερίνη 51 απαιτείται για πλήρη
ενεργοποίηση της Src. Έκφραση της μεταλλαγμένης Src S51A, στην οποία η
Σερίνη 51 έχει μεταλλαχθεί σε Αλανίνη ώστε η θέση αυτή να μη
φωσφορυλιώνεται in vivo, οδηγεί σε μείωση του ποσοστού των γεφυρών DNA με
actin patches και αύξηση του ποσοστού των σπασμένων γεφυρών DNA.
Αντίθετα, έκφραση της μεταλλαγμένης Src S51D, όπου η Σερίνη 51 έχει
μεταλλαχθεί σε Ασπαραγινικό οξύ ώστε η θ έση α υτή ν α μ ιμείται συνεχώς την
φωσφορυλίωση, προστατεύει την δημιουργία των actin patches και εμποδίζει το
σπάσιμο των γεφυρών DNA σε κύτταρα με μειωμένη έκφραση των Chk1 και Src
πρωτεϊνών. Με βάση τα δεδομένα αυτά, προτείνουμε ένα νέο μηχανισμό
σταθεροποίησης των γέφυρων DNA κατά την κυτταροκίνηση, μέσω διατήρησης
των actin patches από τις πρωτείνες Chk1 και Src.
|
Μελέτη του ρόλου των πρωτεϊνών Chk1 και Src στην κυτταροκίνηση παρουσία γεφυρών χρωματίνης
