| Περίληψη |
Όπως είναι γνωστό τα οπιοειδή προκαλούν αναστολή του πολλαπλασιασμού των κυττάρων, συμπεριλαμαβανομένων και των νεοπλασματικών κυττάρων του μαστού και αναδιοργάνωση του κυτταροσκελετού της ακτίνης σε φυσιολογικά νεφροσωληναριακά επιθηλιακά κύτταρα (ΟΚ). Στην παρούσα μελέτη διερευνήθηκαν οι πιθανές αντινεοπλασματικές δράσεις των οπιοειδών αγωνιστών στον κυτταροσκελετό της ακτίνης. Χρησιμοποιήσαμε ως μοντέλο κλώνους που εκφράζουν διαφορετικές μεταλλάξεις της ακτίνης, στην Cys374, των κυττάρων OK και νεοπλασματικά επιθηλιακά νεφροσωληναριακά κύτταρα ανθρώπου Caki-2. Πειράματα western blot ανάλυσης σε TritonX-100 διαλυτά και αδιάλυτα κυτταρικά κλάσματα έδειξαν στατιστικώς σημαντική αύξηση του λόγου μονομερούς/ολική ακτίνη (G/Total) στους μεταλλαγμένους κλώνους των ΟΚ, με επίδραση των οπιοειδών αγωνιστών αιθυλκετοκυκλαζοσίνη και αs1-καζομορφίνη και του παράγοντα TNF-α για 30 λεπτά. Επίδραση του οπιοειδούς α s1 -καζομορφίνη στα καρκινικά κύτταρα οδήγησε σε παροδική αύξηση του λόγου μονομερούς/πολυμερή (G/F) ακτίνη, στα 30 λεπτά, ενώ επίδραση της αιθυλκετοκυκλαζοσίνης στα κύτταρα αυτά οδήγησε σταδιακά σε μείωση του λόγου G/F στο χρονικό διάστημα των δύο ωρών. Ακολούθησε περαιτέρω ανάλυση των μοριακών μηχανισμών δράσης των οπιοειδών στον κυτταροσκελετό των Caki-2. Πειράματα ανοσοκατακρήμνισης με το μονοκλωνικό αντίσωμα της φωσφοτυροσίνης στα νεοπλασματικά κύτταρα έδειξαν ισχυρή φωσφορυλίωση των πρωτεϊνών Fak και παξιλλίνης, παρουσία του οπιοειδούς αιθυλκετοκυκλαζοσίνη. Η πιθανή συμμετοχή της PI-3 κινάσης στη φωσφορυλίωση των πρωτεϊνών Fak και παξιλλίνης, με επίδραση αιθυλκετοκυκλαζοσίνης, διερευνήθηκε με χρήση του εξειδικευμένου αναστολέα της PI-3 κινάσης (βορτμανίνη), που όπως έδειξε η ενεργοποίηση της κινάσης αυτής είναι υπεύθυνη για τη φωσφορυλίωση των πρωτεϊνών αυτών. Τα αποτελέσματα αυτά δείχνουν ότι δύο διαφορετικοί οπιοειδείς αγωνιστές έχουν αντίθετα αποτελέσματα στη δυναμική πολυμερισμού της ακτίνης στα καρκινικά κύτταρα Caki-2 και ότι η φωσφορυλίωση σε τυροσίνη των προτεϊνών Fak και Παξιλλίνης, από την επίδραση της αιθυλκετοκυκλαζοσίνης, εξαρτάται από την ενεργοποίηση της PI-3 Κινάσης στα κύτταρα αυτά. Επομένως η παρούσα διατριβή δίνει νέα στοιχεία όσον αφορά την κατανόηση του μηχανισμού δράσης των οπιοειδών στα καρκινικά κύτταρα του νεφρώνα, με ελπιδοφόρα μηνύματα χρησιμοποίησής τους ως δυναμικό στόχο-φάρμακο για τη θεραπεία του καρκίνου.
|
Επίδραση οπιοειδών στους κυτταρικούς κλώνους που εκφράζουν διαφορετικές μεταλλάξεις της ακτίνης και στη νεοπλασματική σειρά Caki-2
