|
|
| Κωδικός Πόρου |
uch.biology.msc//2004vrettos |
| Τίτλος |
Τεκμηρίωση και χαρακτηρισμός του ρυθμιστικού ρόλου του miR-13 |
| Συγγραφέας |
Βρεττός, Νικόλαος
|
| Περίληψη |
Τα MicroRNAs είναι μικρά μονόκλωνα RNA μόρια, 22 νουκλεοτιδίων περίπου, που δύναται να συντονίζουν σημαντικές κυτταρικές λειτουργίες σε ζώα και φυτά. Επιτελούν ρύθμιση στο μετα-μεταγραφικό επίπεδο. Στοχεύουν mRNA και τα οδηγούν στο μονοπάτι παρεμπόδισης της πρωτεινοσύνθεσης ή σε αυτό της ενδονουκλεόλυσης (RNAi). Η υποοικογένεια των miRNAs K-box miR-2/miR-13 στη Drosophila περιέχει μέλη με υψηλή ομολογία και πιθανώς συγγενή λειτουργικό ρόλο. Το γονίδιο CG10222 είναι φορέας της αλληλουχίας K-box στο 3΄UTR του μέσω του οποίου δύναται να ρυθμίζεται αρνητικά από μέλη της υποοικογένειας miR-2/miR-13. Στην παρούσα εργασία κατασκευάστηκαν ετερόλογα πλασμίδια αισθητήρες που περιείχαν την κωδική περιοχή της EGFP ενωμένη με το 3΄UTR του γονιδίου CG10222 καθώς και με τροποποιημένες εκδόσεις του στην περιοχή του K-box. Οι τροποποιήσεις είχαν γίνει με τρόπο ώστε να αίρεται ή να υποβοηθάται η αλληλεπίδραση μεταξύ miRNA και mRNA. Όλα τα μετάγραφα βρίσκονταν υπό τον έλεγχο μεταγραφής ενός συστατικού υποκινητή τουμπουλίνης. Οι κατασκευές αυτές χρησιμοποιήθηκαν για την παραγωγή σταθερών διαγονιδιακών σειρών Drosophila. Ακολούθησε η ανάλυση του φθορισμού της EGFP σε προνύμφες 3ου σταδίου και εμβρυϊκούς δίσκους φτερών. Το συμπέρασμα που εξάγεται είναι ότι το miR-13b είναι αρνητικός ρυθμιστής της έκφρασης του γονιδίου CG10222 μέσω της αλληλεπίδρασης με την περιοχή 11-24 νουκλεοτίδια μετά του κωδικού λήξης, στο 3΄UTR του μεταγράφου του. Επιπλέον φάνηκε ότι το miR-13b εκφράζεται σε όλα τα σωματικά μέρη της προνύμφης εκτός των αρσενικών γονάδων. Η λειτουργία του CG10222 είναι άγνωστη. Πειράματα εφαρμογής RNAi έναντί του σε έμβρυα Drosophila δείχνουν ότι επιτελεί κάποια ζωτικής σημασίας λειτουργία.. Ενδείξεις επίσης δημιουργούνται για πιθανή ιστοειδική έκφραση στους όρχεις.
|
| Ημερομηνία έκδοσης |
2004-11-01 |
| Ημερομηνία διάθεσης |
2005-01-10 |
| Συλλογή
|
Σχολή/Τμήμα--Σχολή Θετικών και Τεχνολογικών Επιστημών--Τμήμα Βιολογίας--Μεταπτυχιακές εργασίες ειδίκευσης
|
|
|
Τύπος Εργασίας--Μεταπτυχιακές εργασίες ειδίκευσης
|
| Εμφανίσεις |
359 |
Τεκμηρίωση και χαρακτηρισμός του ρυθμιστικού ρόλου του miR-13
