Your browser does not support JavaScript!

Αρχική    Ταυτοποίηση και χαρακτηρισμός β-1,3(4)-γλουκανάσης προερχόμενης από θαλάσσιο περιβάλλον με ακραίες συνθήκες  

Αποτελέσματα - Λεπτομέρειες

Προσθήκη στο καλάθι
[Προσθήκη στο καλάθι]
Κωδικός Πόρου 000467130
Τίτλος Ταυτοποίηση και χαρακτηρισμός β-1,3(4)-γλουκανάσης προερχόμενης από θαλάσσιο περιβάλλον με ακραίες συνθήκες
Άλλος τίτλος Identification and characterization of a β-1,3(4)-glucanase originating from extreme marine environment
Συγγραφέας Ευαγγελάτου, Ροδόκλεια Π.
Σύμβουλος διατριβής Παυλίδης, Ιωάννης
Μέλος κριτικής επιτροπής Ελευθεριάδης, Νικόλαος
Πολυμενάκου, Παρασκευή
Περίληψη Τα φύκη αποτελούν ένα μεγάλο μέρος της θαλάσσιας βιομάζας και, όντας πηγή σπάνιων πολυσακχαριτών, η εκμετάλλευσή τους απαιτεί εύρωστα ένζυμα ικανά να αποικοδομούν υδατάνθρακες σε βιομηχανικής κλίμακας διεργασίες. Το θαλάσσιο μικροβίωμα αποτελεί ανεξάντλητη πηγή τέτοιων βιοκαταλυτών, λόγω της μεγάλης βιοποικιλότητας που το χαρακτηρίζει. Στο πλαίσιο εύρεσης ενζύμων με τέτοια χαρακτηριστικά, εξερευνήθηκαν μεταγονιδιωματικές βιβλιοθήκες από το υποθαλάσσιο ηφαίστειο Κολούμπο, ένα ακραίο περιβάλλον λόγω θερμοκρασίας και άλλων φυσικοχημικών παραγόντων, που βρίσκεται στο Ελληνικό ηφαιστειακό τόξο. Μέσω βιοπληροφορικής ανάλυσης εντοπίστηκε ένα γονίδιο που πιθανώς κωδικοποιεί μία λαμιναρινάση, την KolG6 (Kolumbo Glucanase 6), η οποία ύστερα από την ανάλυση της αλληλουχίας και της πιθανής δομής της, ταξινομήθηκε στην οικογένεια GH16. Η έκφραση του γονιδίου και η παραγωγή διαλυτού ενζύμου επετεύχθη με την τεχνική σύντηξης της πρωτεΐνης ενδιαφέροντος με την πρωτεΐνη πρόσδεσης μαλτόζης (Maltose Binding protein, MBP) του βακτηρίου E.coli. Το ανασυνδυασμένο ένζυμο MBP-KolG6Δ2-22 απομονώθηκε και χαρακτηρίστηκε σε διάφορες συνθήκες θερμοκρασίας, pH και αλατότητας με τη χρήση διάφορων υποστρωμάτων πολυσακχαριτών. Ο βιοχημικός χαρακτηρισμός του ενζύμου έδειξε ότι τελικά πρόκειται για μία β-1, 3(4) γλουκανάση, με βέλτιστη ενεργότητα σε ρυθμιστικό διάλυμα φωσφορικών αλάτων νατρίου pH 7.0, στους 40°C και σε σημαντικά υψηλές συγκεντρώσεις άλατος, έως και 4 M. Σε βέλτιστες συνθήκες αντίδρασης παρουσιάζει ειδική ενεργότητα στα 0.76±0.04 U/mg στο υπόστρωμα β-γλουκάνη από κριθάρι. Όσον αφορά τα προϊόντα αποικοδόµησης, η ανάλυση χρωματογραφίας λεπτής στοιβάδας έδειξε πως το ένζυμο MBP-KolG6Δ2-22 έχει ενδο- και εξω-δραστικότητα. Βάσει των πειραμάτων κυκλικού διχρωισμού, το ανασυνδυασμένο ένζυμο παρουσιάζει 3 θερμοκρασίες τήξης (Tm), στους 36.8±0.1°C, 54.5±0.2°C και 75.2±0.0°C, ενώ ο χρόνος ημίσειας ζωής του ενζύμου στους 35°C υπολογίστηκε στις 12 h. Βασιζόμενοι σε αυτά τα χαρακτηριστικά του ενζύμου, μπορούμε να πούμε πως το ένζυμο KolG6 μπορεί να αποτελέσει ένα σημαντικό βιοτεχνολογικό εργαλείο, ειδικά μετά από περαιτέρω βελτιστοποίησή του με τεχνικές πρωτεϊνικής μηχανικής.
Φυσική περιγραφή xiii, 70 σ. : πίν., σχήμ., εικ. ; 30 εκ.
Γλώσσα Ελληνικά
Θέμα CaZumes
Μεταγονιδίωμα
Ημερομηνία έκδοσης 2024-11-28
Συλλογή   Σχολή/Τμήμα--Σχολή Θετικών και Τεχνολογικών Επιστημών--Τμήμα Χημείας--Μεταπτυχιακές εργασίες ειδίκευσης
  Τύπος Εργασίας--Μεταπτυχιακές εργασίες ειδίκευσης
Εμφανίσεις 553

Ψηφιακά τεκμήρια
No preview available

Κατέβασμα Εγγράφου
Προβολή Εγγράφου
Εμφανίσεις : 13