Your browser does not support JavaScript!

Αρχική    Ανάλυση και αντιμετώπιση ανθεκτικότητας στα εντομοκτόνα με χρήση βιοτεχνολογίας και φυτικών εκχυλισμάτων (Green Chemistry)  

Αποτελέσματα - Λεπτομέρειες

Προσθήκη στο καλάθι
[Προσθήκη στο καλάθι]
Κωδικός Πόρου 000408031
Τίτλος Ανάλυση και αντιμετώπιση ανθεκτικότητας στα εντομοκτόνα με χρήση βιοτεχνολογίας και φυτικών εκχυλισμάτων (Green Chemistry)
Συγγραφέας Παντελέρη, Ραφαέλα Π.
Σύμβουλος διατριβής Γανωτάκης, Δημήτριος
Μέλος κριτικής επιτροπής Τσιώτης, Γεώργιος
Βόντας, Ιωάννης
Περίληψη Η ανθεκτικότητα στα εντομοκτόνα αποτελεί ένα μείζον πρόβλημα τόσο στον τομέα της υγείας όσο και στον τομέα της γεωργίας. Η αυξημένη και αλόγιστη χρήση χημικών εντομοκτόνων, επιταχύνει τους ρυθμούς ανάπτυξης του φαινομένου, ενώ μπορεί να φανεί καταστροφική για την υγεία του ανθρώπου και το περιβάλλον. Στην παρούσα μελέτη πραγματοποιήθηκε αναζήτηση εναλλακτικών ουσιών, φιλικών προς το περιβάλλον, που δρουν συνεργιστικά με εντομοκτόνα αυξάνοντας την δραστικότητά τους. Επιπλέον, κατασκευάστηκαν μοριακά εργαλεία με σκοπό τη χρήση τους στη διαλεύκανση των μηχανισμών ανθεκτικότητας και την αξιολόγηση νέων εντομοκτόνων και συνεργιστών. Συγκεκριμένα, στο πρώτο μέρος πραγματοποιήθηκε έλεγχος φυτικών εκχυλισμάτων για την ενδεχόμενη παρεμποδιστική δράση τους ενάντια σε κυτοχρώματα P450, τα οποία έχει αποδειχθεί ότι υπερεκφράζονται σε ανθεκτικούς πληθυσμούς. Χρησιμοποιήθηκαν τα ανασυνδυασμένα ένζυμα CYP9J32 και CYP392A16, που μεταβολίζουν πυρεθροειδή εντομοκτόνα και αβερμεκτίνες, αντίστοιχα. Ως υποστρώματα των ενζύμων αυτών χρησιμοποιήθηκαν το 7-ethoxycoumarin και η προλουσιφερίνη ME-EGE. Οι δύο διαφορετικές πειραματικές προσεγγίσεις, που βασίζονται στη μέθοδο του φθορισμού και της φωταύγειας αντίστοιχα, χρησιμοποιήθηκαν λόγω των διαφορετικών χαρακτηριστικών που εμφάνισαν τα φυτικά εκχυλίσματα. Επτά από αυτά παρουσίασαν το υψηλότερο ποσοστό παρεμπόδισης στη δραστικότητα των ενζύμων υποδεικνύοντας ενδεχόμενη συνεργιστική δράση (Potentilla rectaαπό τα πειράματα με την CYP9J32 και Pyracantha coccinea, Rosa pulverulenta, Potentilla pedata, Rosa sempervirens, Prunus webiiκαι Rubus sanctus από τα πειράματα με την CYP392A16). Στο δεύτερο μέρος κατασκευάστηκαν δύο στελέχη D. melanogasterπου φέρουν σημειακές μεταλλαγές οι οποίες έχουν ανιχνευθεί σε ανθεκτικούς πληθυσμούς. Εξακριβώθηκε ότι οι μεταλλαγές αυτές είναι ικανές να επάγουν φαινοτύπους ανθεκτικότητας σε γενετικό υπόβαθρο που δεν περιέχει άλλους μηχανισμούς ανθεκτικότητας. Επιπλέον, αποδείχθηκε ότι μπορούν να χρησιμοποιηθούν ως εργαλεία για την αξιολόγηση εντομοκτόνων και συνεργιστών. Το πρώτο στέλεχος, το οποίο φέρει τη μεταλλαγή I1056F στο γονίδιο της συνθάσης της χιτίνης (αντίστοιχη της I1017F του τετρανύχου), χρησιμοποιήθηκε σε βιοδοκιμές τοξικότητας όπου φάνηκε ότι τα εντομοκτόνα etoxazole, buprofezin, diflubenzuron και lufenuron, ο μηχανισμός δράσης των οποίων δεν είχε εξακριβωθεί, αλληλεπιδρούν με το μόριο της συνθάσης της χιτίνης.Το δεύτερο στέλεχος που κατασκευάστηκε φέρει τη μεταλλαγή L1014F στο γονίδιο των τασεοελεγχόμενων καναλιών νατρίου (para) και χρησιμοποιήθηκε για τη δημιουργία στελεχών που φέρουν δύο διαφορετικούς μηχανισμούς ανθεκτικότητας. Συγκεκριμένα, διασταυρώθηκε με στελέχη που φέρουν γονίδια μονοοξυγενασών (Cyp9j28και Cyp6bq23) υπό τον έλεγχο του συστήματος GAL4/UAS, προκειμένου τα δύο νέα στελέχη να χρησιμοποιηθούν για την αξιολόγηση νέων εντομοκτόνων και συνεργιστών. Η δημιουργία στελέχους που εκφράζει τον προαγωγό HRGAL4 σε γενετικό υπόβαθρο L1014F, το οποίο ήταν απαραίτητο για την διασταύρωση με τα στελέχη UAS για την έκφραση των εκάστοτε γονιδίων, δεν κατέστη εφικτή καθώς αποδείχθηκε ότι το διαγονίδιο hrgal4βρίσκεται στο δεύτερο χρωμόσωμα και όχι στο τρίτο, σε αντίθεση με τη βιβλιογραφία.
Φυσική περιγραφή 80 σ. : σχεδ., πιν., εικ. (μερ. έγχ.) ; 30 εκ.
Γλώσσα Ελληνικά
Θέμα Detoxyfication enzymes
Drosophila melanogaster
Plant extracts
Ένζυμα αποτοξικοποίησης
Φυσικά προϊόντα
Ημερομηνία έκδοσης 2017-03-17
Συλλογή   Σχολή/Τμήμα--Σχολή Θετικών και Τεχνολογικών Επιστημών--Τμήμα Χημείας--Μεταπτυχιακές εργασίες ειδίκευσης
  Τύπος Εργασίας--Μεταπτυχιακές εργασίες ειδίκευσης
Εμφανίσεις 73

Ψηφιακά τεκμήρια
No preview available

Προβολή Εγγράφου
Εμφανίσεις : 5