E-Locus - Ιδρυματικό Καταθετήριο Πανεπιστημίου Κρήτης - Διαφορική ρύθμιση των γονιδίων του μείζονος συμπλόκου ιστοσυμβατότητας τάξης ΙΙ από τη μεθυλοτρανσφεράση PRMT6, μέσω μιας ΑΤ-hook, μιας νέας πρωτεϊνικής επικράτειας του RFX5

Αρχική Διαφορική ρύθμιση των γονιδίων του μείζονος συμπλόκου ιστοσυμβατότητας τάξης ΙΙ από τη μεθυλοτρανσφεράση PRMT6, μέσω μιας ΑΤ-hook, μιας νέας πρωτεϊνικής επικράτειας του RFX5

Αποτελέσματα - Λεπτομέρειες

[Προσθήκη στο καλάθι]

Κωδικός Πόρου

000370721

Τίτλος

Διαφορική ρύθμιση των γονιδίων του μείζονος συμπλόκου ιστοσυμβατότητας τάξης ΙΙ από τη μεθυλοτρανσφεράση PRMT6, μέσω μιας ΑΤ-hook, μιας νέας πρωτεϊνικής επικράτειας του RFX5

Άλλος τίτλος

Differential regulation of major histocompatibility complexes class II by the methyltransferase PRMT6, through a newly identified AT-hook in RFX5

Συγγραφέας

Σταυρίδη, Φοίβη

Σύμβουλος διατριβής

Παπαματθαιάκης, Ιωσήφ

Περίληψη

Η οικογένεια των γονιδίων του Μείζονος Συμπλόκου Ιστοσυμβατότητας τάξης ΙΙ (MHCII) είναι καθοριστικής σημασίας για την ανάπτυξη και λειτουργία του επίκτητου ανοσοποιητικού συστήματος. Η μεταγραφή όλων των μελών της οικογένειας ελέγχεται από τον κύριο ενεργοποιητή τους, CIITA, και ένα σύνολο παραγόντων προσδενόμενων στο DNA, από τους οποίους σημαντικότερος είναι ο RFX5. Προηγούμενα αποτελέσματα από το εργαστήριό μας έδειξαν ότι ο RFX5 υπόκειται σε μεθυλίωση αργινίνης από την οικογένεια μεθυλοτρανσφερασών PRMT. Σκοπός της παρούσας εργασίας ήταν η χαρτογράφηση και διερεύνηση της βιολογικής σημασίας των μεθυλιώσεων αυτών. Η χαρτογράφηση των αργινινών-στόχων μεθυλίωσης αποτέλεσε το πρώτο μέρος της εργασίας και έγινε σε δύο φάσεις: Αρχικά προσδιορίστηκαν οι περιοχές που περιείχαν τα κατάλοιπα αργινίνης-στόχους μεθυλίωσης, μέσα από μια διαδικασία διαδοχικών κλωνοποιήσεων, έκφρασης των αντίστοιχων πρωτεϊνών και μεθυλιώσεων in vitro, ενώ στη συνέχεια έγινε πιο λεπτομερής χαρτογράφηση με την κατασκευή μοναδιαίων μεταλλαγών όλων των αργινινών των περιοχών αυτών. Στο δεύτερο μέρος της εργασίας αξιολογήθηκε η σημασία των μεθυλιώσεων αυτών, τόσο πειραματικά όσο και με μεθόδους βιοπληροφορικής. Κατά την ανάλυση αυτή εντοπίστηκε μία βοηθητική επικράτεια πρόσδεσης του DNA, τύπου AT-hook. Η ύπαρξη της επικράτειας αυτής στο μόριο του RFX5 ήταν προηγουμένως άγνωστη, ενώ αντίθετα, η μεθυλίωση αργινίνης τέτοιων επικρατειών, και συγκεκριμένα από τη μεθυλοτρανσφεράση PRMT6, έχει δημοσιευτεί στο παρελθόν. Το τρίτο μέρος της εργασίας αυτής εστιάστηκε στη διερεύνηση του ρόλου της επικράτειας AT-hook και της πιθανής ρύθμισής της από την PRMT6. Για το σκοπό αυτό κατασκευάστηκαν και μελετήθηκαν σταθεροί κλώνοι που φέρουν είτε τον αγρίου τύπου, είτε μία μορφή του παράγοντα RFX5 με έλλειψη της AT-hook (RFX5-Δhook), ενώ ο ρόλος της PRMT6 διερευνήθηκε με πειράματα υπερέκφρασής της in vivo. 1 Τα αποτελέσματά μας δείχνουν ότι η AT-hook παρουσιάζει διαφορετική δράση ανάλογα με την ισομορφή MHCII που εξετάζεται. Το ίδιο παρατηρείται και για την επίδραση της PRMT6, η δράση της οποίας διαμεσολαβείται από την AT-hook. Η επίδραση της PRMT6 αποτελεί επομένως τον πρώτο γνωστό μηχανισμό με τον οποίο μπορεί να γίνει διαφορική ρύθμιση της έκφρασης των MHCII υπό φυσιολογικές συνθήκες, μία ανακάλυψη με ιδιαίτερο μηχανιστικό και ανοσολογικό ενδιαφέρον, αλλά και πιθανές κλινικές εφαρμογές.

Φυσική περιγραφή

105 σ. : χάρτ., πίν., έγχ. εικ. ; 30 εκ.

Γλώσσα

Ελληνικά

Θέμα

Arginine methylation

HLA-DQ

HLA-DR

MHCII

Μεθυλίωση Αργινίνης

Ημερομηνία έκδοσης

2013-07-11