| Περίληψη |
Ο εκλυτικός παράγοντας της κορτικοτροπίνης (corticotropin releasing factor, CRF) είναι ένα πεπτίδιο 41 αμινοξέων που ασκεί πληθώρα βιολογικών δράσεων μέσω αλληλεπίδρασης του με 2 τύπους υποδοχέων, τον τύπο 1 (CRF1R) και τύπο 2 (CRF2R). Οι υποδοχείς του CRF ανήκουν στη κατηγορία των υποδοχέων που συζευγνύονται με τις G-πρωτεΐνες (GPCRs). Όπως όλοι οι GPCRs έτσι και οι CRF υποδοχείς περιέχουν μια αμινοτελική εξωκυττάρια περιοχή, μια καρβοξυτελική ενδοκυττάρια περιοχή και 7 διαμεμβρανικές περιοχές (ΤΜ1-7) που ενώνονται με τρείς εξωκυττάριους και τρείς ενδοκυττάριους βρόγχους. Ο CRF δεσμεύεται στις εξωκυττάριες περιοχές των υποδοχέων του, ενώ τα CRF1R-εκλεκτικά μη πεπτιδικά ανάλογα όπως η ανταλαρμίνη, δεσμεύονται σε αμινοξέα των διαμεβρανικών περιοχών του CRF1R και ανταγωνίζονται τις δράσεις του CRF αλλοστερικά. Αξιοπερίεργο αποτελεί το γεγονός ότι ενώ όλες οι θέσεις δέσμευσης των CRF1R-εκλεκτικών μη πεπτιδικών ανταγωνιστών στον CRF1R διατηρούνται στον CRF2R, τα μόρια αυτά δεν δεσμεύονται στον CRF2R. Με βάση μοριακά πρότυπα που κατασκευάσαμε υποθέσαμε ότι σημαντικό ρόλο στην εκλεκτικότητα δέσμευσης των CRF1R-εκλεκτικών μη πεπτιδικών ανταγωνιστών διαδραματίζει η ύπαρξη 2 αμινοξέων στον CRF1R που βρίσκονται πάνω από τις θέσεις δέσμευσης των ανταγωνιστών αυτών και τα οποία δεν υπάρχουν στον CRF2R. Τα αμινοξέα αυτά σχηματίζουν ένα δίκτυο δεσμών που επηρεάζει τη δέσμευση των CRF1Rεκλεκτικών μη πεπτιδικών ανταγωνιστών του υποδοχέα. Τα αμινοξέα αυτά είναι η Met276 στην πέμπτη διαμεμβρανική περιοχή (TM5) και η His199 στην τρίτη διαμεμβρανική περιοχή (TM3) του CRF1R. Αντίθετα στον CRF2R τα αντίστοιχα είναι Val195 και Ile272. Υποθέτουμε ότι αντικαθιστώντας τα Val195 και Ile272 του CRF2R με τα αντίστοιχα His199 και Met276 του CRF1R, θα δημιουργήσουμε έναν ή περισσότερους μεταλλαγμένους CRF2R υποδοχείς (V195H, I272M και V195H+I272M) που θα δεσμεύουν τους CRF1R-εκλεκτικούς μη πεπτιδικούς ανταγωνιστές. Στην παρούσα μελέτη αντικαταστήσαμε τη Ile272 του CRF2R με την αντίστοιχη Met276 του CRF1R και μελετήσαμε τις φαρμακολογικές ιδιότητες του 2 μεταλλαγμένου υποδοχέα, I272M, και ιδιαίτερα την ικανότητά του να δεσμεύει CRF1R-εκλεκτικούς μη πεπτιδικούς ανταγωνιστές. Οι μελέτες αυτές στο σύνολο τους θα βοηθήσουν στο σχεδιασμό νέων CRF1Rκαι CRF2R-εκλεκτικών μη πεπτιδικών ανταγωνιστών που θα χρησιμοποιηθούν στη μελέτη των υποδοχέων αυτών καθώς και του ρόλου τους σε διάφορες φυσιολογικές λειτουργίες και παθοφυσιολογικές καταστάσεις.
|
Φαρμακολογικός χαρακτηρισμός του τύπου 2 υποδοχέα του εκλυτικού παράγοντα της κορτικοτροπίνης (CRF2R) μετά από μετάλλαξη της Ile272 σε Met.
