| Περίληψη |
Τα κολονικά επιθηλιακά κύτταρα του εντέρου εκφράζουν χημειοκίνες σχετιζόμενες με την Th1 ανοσολογική 7.2 Περίληψη απόκριση. Ωστόσο λίγα είναι γνωστά για τον ρόλο των επιθηλιακών κυττάρων στην Th2 ανοσολογική αντίδραση. Επιπλέον η μετανάστευση των Τ λεμφοκυττάρων, τα οποία εκφράζουν στην επιφάνειά τους υποδοχείς χημειοκινών, προς το κολονικό επιθήλιο εμπλέκεται στην αιτιοπαθογένεια της Crohn και Ελκώδους Κολίτιδας.
Μελετήσαμε την έκφραση των CXC χημειοκινών MIG, IP-10, και I-TAC οι οποίες προσδένονται στον CXCR3A υποδοχέα των Th1 κυκλοφορούντων λεμφοκυττάρων ή στο μεταγραφικό του αλλήλιο CXCR3B αλλά και των CC χημειοκινών, CCL11/Eotaxin-1, CCL24/Eotaxin-2, και CCL26/Eotaxin-3 οι οποίες προσδένονται στον CCR3 υποδοχέα των Th2 κυκλοφορούντων λεμφοκυττάρων σε ασθενείς με Νόσο Crohn, Ελκώδη Κολίτιδα και σε υγιείς μάρτυρες.
Αποτελέσματα
Tα mRNA των τριών CXCR3 συνδεόμενων χημειοκινών (MIG, IP-10 και ITAC) ανευρίσκονται αυξημένα σε βιοψίες παχέος εντέρου ασθενών με Νόσο Crohn (CD). Παρομοίως ανευρίσκονται αυξημένα τα επίπεδα των MIG και ITAC χημειοκινών στον ορό των ασθενών με Νόσο Crohn και λιγότερο με Ελκώδη Κολίτιδα σε σχέση με τους υγιείς μάρτυρες. In vitro πειράματα σε κολονικά επιθηλιακά κύτταρα έδειξαν επαγωγή της έκφρασης mRNA και της παραγωγής των τριών χημειοκινών MIG, IP-10 και I-TAC και στις δύο κυτταρικές σειρές μετά από επίδραση Th1 κυτταροκινών. Επίδραση των Th2 αντιφλεγμονωδών κυτταροκινών (IL-4, IL-10, IL-13) στην επαγόμενη από τις Th1 κυτταροκίνες (Π.-1α, TNF-α και IFN-γ) έκφραση των τριών CXCR3 συνδεόμενων χημειοκινών είχε ως αποτέλεσμα την αναστολή της έκφρασης και παραγωγής των χημειοκινών αυτών και στις δύο επιθηλιακές κυτταρικές σειρές. Ο υποδοχέας των χημειοκινών αυτών, CXCR3 ανιχνεύτηκε σημαντικά αυξημένος με κυτταρομετρία ροής σε CD3+ ανοσομαγνητικά διαχωρισθέντα περιφερικά λεμφοκύτταρα ασθενών με Νόσο Crohn και λιγότερο με Ελκώδη Κολίτιδα σε σχέση με τους υγιείς μάρτυρες. Σε ανοσομαγνητικά διαχωρισθέντα CD3+ περιφερικά λεμφοκύτταρα από ασθενείς με Νόσο Crohn παρατηρήθηκε κυρίως έκφραση mRNA του μεταγραφικού αλληλίου CXCR3B υποδοχέα, Αντίθετα υγιείς μάρτυρες εξέφραζαν κυρίως το mRNA του CXCR3A ενώ στην Ελκώδη
Κολίτιδα παρατηρήθηκε παρόμοια έκφραση CXCR3A και CXCR3B. In vitro επιδράσεις στη λευχαιμική κυτταρική σειρά Jurkat έδειξαν επαγωγή των CXCR3A και CXCR3B mRNAs μετά από επίδραση με IFN-γ, ενώ η Π.-1α προκαλούσε επαγωγή μόνο του CXCR3B mRNA. Επίδραση TNF-α είχε ως αποτέλεσμα επαγωγή του CXCR3A.
Όσον αφορά τις CC χημειοκίνες, σε βιοψίες παχέoς εντέρου παρατηρήθηκε σημαντική αύξηση του mRNA και των τριών CCR3 συνδεόμενων χημειοκινών - CCL11 (eotaxin), CCL24 (eotaxin 2) και CCL26 (eotaxin 3) - σε ιστούς ασθενών με Ελκώδη Κολίτιδα σε σχέση με φυσιολογικούς μάρτυρες και ασθενείς με Νόσο Crohn. Συνολικά και οι τρεις χημειοκίνες που συνδέονται στον CCR3 υποδοχέα βρέθηκαν αυξημένες στον ορό ασθενών με Ελκώδη Κολίτιδα. Κατόπιν μελετήσαμε in vitro στις HT-29 και Caco-2 κυτταρικές σειρές την έκφραση mRNA και την παραγωγή των χημειοκινών αυτών μετά από επίδραση κυτταροκινών. Επίδραση του συνδυασμού των Th1 κυτταροκινών είχε ως αποτέλεσμα αύξηση του mRNA της CCL26/Eotaxin-3 και στις δύο κυτταρικές σειρές καθώς και των χημειοκινών CCL11/Eotaxin-1 και CCL24/Eotaxin-2 σε μικρότερο βαθμό. Επίδραση με το συνδυασμό των προφλεγμωνωδών κυτταροκινών Th2 προκάλεσε σημαντική επαγωγή mRNA και των τριών χημειοκινών, CCL11/Eotaxin-1 και στις δύο κυτταρικές σειρές. Αλλά και σε επίπεδο πρωτεΐνης, οι Th2 προφλεγμονώδεις κυτταροκίνες σε συνδυασμό επάγουν την παραγωγή των CCR3 συνδεόμενων χημειοκινών και στις δύο κολονικές επιθηλιακές κυτταροσειρές. Όσον αφορά τον υποδοχέα των χημειοκινών αυτών CCR3, η έκφραση του mRNA ήταν μέγιστη σε βιοψίες κολονικού βλεννογόνου ασθενών με Ελκώδη Κολίτιδα (95%), σε σχέση με φυσιολογικούς μάρτυρες (20%). Έκφραση παρατηρήθηκε και στο 65% των ασθενών με Νόσο Crohn. Η έκφραση αυτή παρουσιάζονταν ανεξάρτητα από την ενεργότητα της νόσου και το βαθμό φλεγμονής του κολονικού βλεννογόνου. Η κυτταρομετρία ροής σε ανοσομαγνητικά διαχωρισθέντα CD3+ κύτταρα ανέδειξε έκφραση του υποδοχέα CCR3 κυρίως σε ασθενείς με Ελκώδη Κολίτιδα, λιγότερο σε Νόσο Crohn και σχεδόν καθόλου σε υγιείς μάρτυρες.
Συμπεράσματα
Στη μελέτη μας παρατηρήθηκε αυξημένη έκφραση του CXCR3 υποδοχέα σε ανοσομαγνητικά διαχωρισθέντα CD3+ λεμφοκύτταρα περιφερικού αίματος από ασθενείς με Νόσο Crohn και Ελκώδη Κολίτιδα σε σύγκριση με φυσιολογικούς μάρτυρες. Αυτή η έκφραση ήταν υψηλότερη στους ασθενείς με Νόσο Crohn οι οποίοι εξέφραζαν το mRNA του μεταγραφικού αλληλίου CXCR3B. Επιπρόσθετα, η έκφραση των CCR3 συνδεόμενων χημειοκινών και του υποδοχέα τους φαίνεται να είναι χαρακτηριστικό των ασθενών με Ελκώδη Κολίτιδα.
Τα ευρήματα μας τόσο στις CC όσο και στις CXC χημειοκίνες αναδεικνύουν το ρόλο της αλληλεπίδραση επιθηλιακών κυττάρων - λεμφοκυττάρων στην αιτιοπαθογένεια της Νόσου Crohn και της Ελκώδους Κολίτιδας.
|
Η αλληλεπίδραση λεμφοκυττάρων και κολονικών επιθηλιακών κυττάρων στη φλεγμονώδη εντεροπάθεια, ο ρόλος των χημειοκινών
