| Περίληψη |
Στις περισσότερες ενόργανες αναλυτικές τεχνικές, η βαθμονόμηση αποτελεί
απαραίτητο βήμα του πειραματικού μέρους της ανάλυσης. Συνήθως απαιτεί την
προετοιμασία πολλαπλών πρότυπων δειγμάτων, τα οποία χρησιμοποιούνται για τον
προσδιορισμό της ευαισθησίας του οργάνου και κατά συνέπεια είναι απαραίτητα για
την ποσοτικοποίηση του αναλύτη στο δείγμα. Η ανάγκη για την ανάπτυξη μιας
μεθόδου βαθμονόμησης, η οποία να είναι ακριβής, αποτελεσματική και σύντομη
χρονικά, με όσο το δυνατόν μικρότερο αριθμό αναλύσεων πρότυπων δειγμάτων, έχει
οδηγήσει στην ανάπτυξη ποικίλων μεθόδων βαθμονόμησης, καθεμία από τις οποίες
διαθέτει διαφορετικά χαρακτηριστικά.
Στην παρούσα διπλωματική εργασία αναπτύσσεται η Ανάλυση Αραίωσης
Προτύπου (SDA), μια μέθοδος βαθμονόμησης η οποία σε συνδυασμό με
Φασματομετρία Μάζας Ηλεκτροψεκασμού (ESI-MS) εφαρμόστηκε για τον
προσδιορισμό μορίων όπως το αρσενοβιτάνιο (AsB) σε βιολογικά δείγματα. Πιο
συγκεκριμένα, η ανάλυση πραγματοποιείται με τη χρήση δύο μόνο διαλυμάτων: το
πρώτο διάλυμα περιλαμβάνει ένα μίγμα διαλυμάτων δείγματος και προτύπου, όπου το
πρότυπο έχει παρασκευαστεί με γνωστή συγκέντρωση αναλύτη και ένα εσωτερικό
πρότυπο, ενώ το δεύτερο διάλυμα περιλαμβάνει ένα μίγμα διαλυμάτων δείγματος και
τυφλού. Η μετέπειτα ποσοτικοποίηση πραγματοποιείται μέσω ενός διαγράμματος στο
οποίο, ο άξονας y αντιστοιχεί στο λόγο του σήματος αναλύτη προς εσωτερικού
προτύπου, ενώ ο άξονας x αντιστοιχεί στο αντίστροφο της συγκέντρωσης του
εσωτερικού προτύπου. Μέσω λοιπόν του λόγου κλίσης προς τεταγμένη του εν λόγω
διαγράμματος, μπορεί να προσδιοριστεί τελικά η συγκέντρωση του αναλύτη στο
δείγμα. Ωστόσο, για την ανάπτυξη και εφαρμογή της συγκεκριμένης μεθόδου
απαιτήθηκαν σημαντικές βελτιστοποιήσεις τόσο στις παραμέτρους χειρισμού του
οργάνου και στην χρησιμοποιούμενη πειραματική διάταξη, όσο και στην επεξεργασία
των αποτελεσμάτων.
Μέσω μαθηματικών υπολογισμών πραγματοποιήθηκε προσδιορισμός των
συγκεντρώσεων AsB σε υδατικά διαλύματα διαφορετικών συγκεντρώσεων των 5, 10,
20 και 40 ppb AsB, καθώς και σε εκχυλίσματα πιστοποιημένου υλικού αναφοράς από
μυϊκό ιστό τόνου (BCR – 627) με αναμενόμενη συγκέντρωση 9.75 ppb ΑsB. Η
ποσοτικοποίηση κάθε δείγματος εφαρμόστηκε σε δύο περιοχές του διαγράμματος
SDA, μία κατά την αύξηση του σήματος με την προσθήκη γνωστής ποσότητας αναλύτη
στο δείγμα και μία κατά την αραίωση του προτύπου. Οι ανακτήσεις που λήφθηκαν για
τα πρότυπα δείγματα ήταν 106.80 % και 100.80 % για τα 5 ppb, 92.30 % και 95.30 %
για τα 10 ppb, 101.75 % και 100.50 % για τα 20 ppb και 101.98 % και 100.85 % για τα
40 ppb. Για το δείγμα BCR-627 των 9.75 ppb, προέκυψαν ανακτήσεις 72.51 % και
78.67 %, με τις απώλειες να οφείλονται κυρίως στη μη πλήρη εκχύλιση του AsB από
το στερεό δείγμα. Τα παραπάνω αποτελέσματα σε συνδυασμό με περαιτέρω
πειραματικές δοκιμές κατάφεραν να αναδείξουν τη συγκεκριμένη μέθοδο ιδιαίτερα
αποτελεσματική, προσφέροντας σημαντικά πλεονεκτήματα όσον αφορά στο
συνδυασμό ικανοποιητικού χρόνου καταγραφής, περιορισμένης κατανάλωσης
δειγμάτων και ακρίβειας, θέτοντας ωστόσο και πολλά υποσχόμενους μελλοντικούς
στόχους για τη βέλτιστη δυνατή εφαρμογή της μεθόδου.
|
Νέες μέθοδοι βαθμονόμησης στην ποσοτική μοριακή φασματομετρία μάζας: ανάλυση αραίωσης προτύπου
