E-Locus - Ιδρυματικό Καταθετήριο Πανεπιστημίου Κρήτης - α) Εφαρμογές ενζυμικών αναγωγών στην σύνθεση γ-βουτυρολακτονών και του φυσικού προϊόντος Stereocalpin A β) Απομόνωση συνθετικών Κετορεδουκτασών

Αρχική α) Εφαρμογές ενζυμικών αναγωγών στην σύνθεση γ-βουτυρολακτονών και του φυσικού προϊόντος Stereocalpin A β) Απομόνωση συνθετικών Κετορεδουκτασών

Αποτελέσματα - Λεπτομέρειες

[Προσθήκη στο καλάθι]

Κωδικός Πόρου

000406662

Τίτλος

α) Εφαρμογές ενζυμικών αναγωγών στην σύνθεση γ-βουτυρολακτονών και του φυσικού προϊόντος Stereocalpin A β) Απομόνωση συνθετικών Κετορεδουκτασών

Άλλος τίτλος

a) Application of enzymatic reductions in the synthesis of γ-butyrolactones and the natural product Stereocalpin Α b) Isolation of synthetic ketoreductases

Συγγραφέας

Τζανακάκη, Αγγελική Γ.

Σύμβουλος διατριβής

Σμόνου, Ιουλία

Μέλος κριτικής επιτροπής

Βασιλικογιαννάκης, Γεώργιος
Στρατάκης, Εμμανουήλ

Περίληψη

Αντικείμενο της παρούσας εργασίας είναι η μελέτη στερεοεκλεκτικών ενζυμικών αναγωγών με κετορεδουκτάσες για την σύνθεση οπτικά ενεργών ενδιαμέσων φυσικών προϊόντων, καθώς και η ανάπτυξη νέων συνθετικών κετορεδουκτασών. Στο πρώτο μέρος παρουσιάζεται η χημειοενζυμική προσέγγιση για την σύνθεση της αλδολικής υπομονάδας 5-υδροξυ-2,4-διμέθυλο-3-οξο-οκτανοϊκό οξύ (HDMOO) της Stereocalpin A, με σκοπό την διερεύνηση της σωστής στερεοχημείας του φυσικού προϊόντος. Έγινε προσπάθεια σύνθεσης της υπομονάδας αυτής με την ενζυμική αναγωγή σαν στάδιο «κλειδί». Προσδιορίστηκαν συγκεκριμένες κετορεδουκτάσες, οι οποίες οδήγησαν στον σχηματισμό του 5-υδροξυ-4-μεθυλο-3-οξοοκτανοϊκού tert-βουτυλεστέρα με καλή διαστερεομερική αναλογία και μέτρια εναντιομερική περίσσεια ως προς το Β στερεοϊσομερές. Στο δεύτερο μέρος περιγράφεται η στερεοεκλεκτική σύνθεση διυποκατεστημένων γ-βουτυρολακτονών από τρεις διαφορετικούς κέτο διεστέρες με την χρήση κετορεδουκτασών σαν αναγωγικά μέσα. Η ενζυμική αναγωγή απέδωσε αποκλειστικά τις γ-βουτυρολακτόνες, χωρίς καθόλου απομόνωση του ενδιάμεσου υδρόξυ διεστέρα που παράγεται. Δοκιμάστηκαν διάφορες κετορεδουκτάσες σε κάθε περίπτωση, οι οποίες παρουσίασαν εξαιρετικά ποσοστά μετατροπής στις περισσότερες περιπτώσεις, υψηλή διαστερεοεκλεκτικότητα και αρκετά καλή εναντιοεκλεκτικότητα σε μερικές από αυτές. Στο τελευταίο κεφάλαιο περιγράφεται η παραγωγή νέων κετορεδουκτασών καθώς και μελέτη της δραστικότητας τους, χρησιμοποιώντας σαν υπόστρωμα τον 2-μεθυλο οξικό αιθυλεστέρα. Η παραγωγή τους έγινε μέσω της κλωνοποίησης των αλληλουχιών που εκφράζουν την επιθυμητή πρωτεΐνη-κετορεδουκτάση σε βακτηριακά κύτταρα E.coli και δοκιμάστηκαν διάφορες μορφές του ενζύμου για μελέτη της δραστικότητας του.

Φυσική περιγραφή

xii, 95 σ. : πίν., σχήμ., εικ. (μερ. εγχρ.) ; 30 εκ.

Γλώσσα

Ελληνικά

Θέμα

2-Μέθυλο οξικός αιθυλεστέρας

Biocatalysis

Biotechnology

Ethyl 2-methyl acetoacetate

Microbial enzymes

NADPH

Stereocalpin A