|
|
| Κωδικός Πόρου |
000381980 |
| Τίτλος |
The role of amino acids 218-222 of apolipoprotein A-I in the biogenesis of HDL |
| Άλλος τίτλος |
Ο ρόλος των αμινοξέων 218-222 της απολιποπρωτεϊνης Α-Ι στη βιογέννεση της HDL |
|
Συγγραφέας
|
Beck, Melissa Ashley
|
|
Σύμβουλος διατριβής
|
Ζαννής, Β.
|
|
Μέλος κριτικής επιτροπής
|
Καρδάσης, Δ.
Παπακωνσταντή Ε.
|
| Περίληψη |
Η απολιποπρωτεϊνη Α-Ι (αποΑ-Ι) είναι η κύρια πρωτεΐνη των σωματιδίων της λιποπρωτεϊνης
υψηλής πυκνότητας (high density lipoprotein ήHDL). Η έλλειψη της αποΑ-Ι αναστέλλει την
βιοσύνθεση της HDL. Η αποΑ-Ι ενεργοποιεί το ένζυμο ακυλοτρανσφεράση λεκιθίνης:χοληστερόλης
(LCAT) το οποίο εστεροποιεί την ελεύθερη χοληστερόλη της HDL και οδηγεί στην μετατροπή των
πρόδρομων δισκοειδών σε ώριμα σφαιρικά σωματίδια HDL.
Στην παρούσα διατριβή έγινε χρήση γονιδιακής μεταφοράς σε ποντικούς με διπλή έλλειψη σε
αποΑ-Ι και αποΕ (apoA-I -/- x apoE -/- mice) για να προσδιοριστεί ο ρόλος των υδρόφοβων αμινοξέων
στην περιοχή 218-222 της αποΑ-Ι στην βιογένεση της HDL. Πλάσμα που ελήφθη 4 ημέρες μετά την
γονιδιακή μεταφορά της αγρίου τύπου αποΑ-Ι ή της μεταλλαγμένης μορφής της αποΑ-Ι
[L218A/L219A/V221A/L222A] απουσία ή παρουσία της LCAT υπεβλήθη σε διάφορες αναλύσεις που
προσδιορίζουν τον σχηματισμό και την ωρίμανση της HDL. H κλασμάτωση του πλάσματος με υγρή
χρωματογραφία πρωτεϊνών [FPLC] έδειξε ότι σε ποντικούς που εξέφραζαν την μεταλλαγμένη αποΑ-Ι,
το κλάσμα που αντιστοιχεί στην HDL ήταν πολύ μειωμένο σε σύγκριση με ποντικούς εξέφραζαν την
αγρίου τύπου αποΑ-Ι. Ο διαχωρισμός του πλάσματος με υπερφυγοκέντρηση σε διάλυμα KBr
διαβαθμισμένης πυκνότητας και ηλεκτροφόρηση πολυακρυλαμιδίου-SDS των κλασμάτων έδειξε ότι σε
σύγκριση με την αγρίου τύπου αποΑ-Ι , η έκφραση της μεταλλαγμένη αποΑ-Ι οδήγησε σε χαμηλά
επίπεδα αποΑ-Ι που ήταν εντοπισμένα κυρίως στην περιοχή της HDL3. H ανάλυση του πλάσματος με
ηλεκτροφόρηση δυο διαστάσεων και του κλάσματος της HDL με ηλεκτρονική μικροσκοπία έδειξε ότι
οι ποντικοί που εξέφραζαν την μεταλλαγμένη αποΑ-Ι σχημάτισαν preβ1 HDL σωματίδια και μικρό
αριθμό δισκοειδών HDL σωματιδίων. Σε αντίθεση, οι ποντικοί που εξέφραζαν την αγρίου τύπου αποΑ-
Ι σχημάτισαν κυρίως α-HDL σωματίδια (α1, α2, and α3). Ποντικοί που εξέφραζαν την μεταλλαγμένη
πρωτεΐνη μαζί με την LCAT είχαν μια περιοχή (shoulder) αυξημένης χοληστερόλης στην περιοχή των
VLDL/IDL/LDL. Οι ποντικοί αυτοί παρουσίασαν μετατόπιση της αποΑ-Ι προς τις χαμηλότερες
πυκνότητες και σχημάτισαν μικρού μεγέθους σφαιρικά σωματίδια HDL.
Τα ευρήματα αυτά εισηγούνται ότι η αντικατάσταση των υδρόφοβων αμινοξέων της περιοχής
218-222 της αποΑ-Ι με αλανίνη αναστέλλει το μονοπάτι της βιογένεσης της HDL. Η αναστολή αυτή
φαίνεται να προκύπτει από ελαττωματική αλληλεπίδραση της μεταλλαγμένης μορφής της αποΑ-Ι με
τον μεταφορέα ABCA1 σε συνδυασμό με μειωμένη μετατροπή των πρόδρομων δισκοειδών σωματιδίων
σε ώριμα σφαιρικά σωματίδια HDL. O ελαττωματικός φαινότυπος που δημιουργείται από την αποΑ-Ι
[L218A/L219A/V221A/L222A] μπορεί να διορθωθεί εν μέρει παρουσία περίσσειας LCAT.
|
| Φυσική περιγραφή |
143 σ : πιν. ; 30 εκ. |
| Γλώσσα |
Αγγλικά |
| Θέμα |
APOA-I |
|
Adenovirus -mediated gene transfer |
|
HDL Biogenesis |
|
HDL Βιογένεση |
|
LCAT |
|
Απολιποπρωτίνη Α-Ι |
|
Γονιδιακή μεταφορά μέσω αδενοιών |
| Ημερομηνία έκδοσης |
2012-07-24 |
| Συλλογή
|
Σχολή/Τμήμα--Ιατρική Σχολή--Τμήμα Ιατρικής--Μεταπτυχιακές εργασίες ειδίκευσης
|
|
|
Τύπος Εργασίας--Μεταπτυχιακές εργασίες ειδίκευσης
|
| Εμφανίσεις |
147 |
The role of amino acids 218-222 of apolipoprotein A-I in the biogenesis of HDL
