| Περίληψη |
Η χρόνια ιδιοπαθής ουδετεροπενία CIN είναι μια σχετικά συχνή κοκκιοκυτταρική διαταραχή που χαρακτηρίζεται από την παρατεταμένη «ανεξήγητη» ελάττωση του αριθμού των κυκλοφορούντων ουδετεροφίλων πολυμορφοπύρηνων κυττάρων (ΠΜΠ) κάτω από το κατώτερο όριο της φυσιολογικής διακύμανσης που αντιστοιχεί στην ηλικία και τη φυλή του ατόμου. Η αιτιολογία και ο υποκείμενος μηχανισμός της ουδετεροπενίας είναι άγνωστοι. Ωστόσο, προηγούμενες μελέτες στο Εργαστήριο μας έχουν δείξει ότι τουλάχιστον τρεις παράγοντες εμπλέκονται δυνητικά στην παθογένεια της νόσου, μειωμένη παραγωγή ΠΜΠ στο μυελό των οστών, αυξημένη έξοδος ΠΜΠ στους ιστούς και αυξημένη κατακράτηση ΠΜΠ στο σπλήνα. Η μειωμένη παραγωγή ΠΜΠ στο μυελό έχει διερευνηθεί από πολλούς ερευνητές και έχει αποδοθεί σε μειωμένο αριθμό προγονικών κοκκιοκυτταρικών προβαθμίδων στο μυελό, σε μειονεκτική λειτουργία του αιμοποιητικού μικροπεριβάλλοντος, σε μειωμένη παραγωγή G-CSF και, ακόμη, σε αυξημένη παραγωγή αναστολέων της κοκκιοποίησης. Πρόσφατα, αποδείχθηκε με κυτταρομετρία ροής στο Εργαστήριό μας ότι η μειωμένη παραγωγή ΠΜΠ στους πάσχοντες οφείλεται σε αυξημένη απόπτωση των CD34+/CD33+ μυελικών προγονικών προβαθμίδων που σχετίζεται με αυξημένη παραγωγή TNF-α από τα κύτταρα του αιμοποιητικού μικροπεριβάλλοντος. Στην παρούσα μελέτη διερευνήθηκε το φαινόμενο της απόπτωσης των μυε-λικών προγονικών προβαθμίδων των ασθενών σε ιστολογικές τομές μυελού των ο-στών και ανοσομαγνητικά διαχωρισθέντα μυελικά προγονικά κύτταρα χρησιμο-ποιώντας την τεχνική ISEL (in situ end labeling technique). Μελετήθηκαν 39 ασθενείς με CIN και 12 φυσιολογικά άτομα ως μάρτυρες. Η τεχνική εφαρμόσθηκε ως “απλή χρώση” για τον έλεγχο της απόπτωσης στις ιστολογικές τομές και τα ανοσομαγνητικά διαχωρισθέντα CD34+, CD34+/CD33+ και CD34-/CD33+ κύτταρα, και ως “διπλή χρώση” για τον έλεγχο της απόπτωσης στα CD34+ και CD15+ κύτταρα στις ιστολογικές τομές με τη χρήση ειδικών μονοκλωνικών αντισωμάτων. Τα αποτελέσματα ελέγχθηκαν με τις στατιστικές δοκιμασίες χ2-test και t-test του Student. Βρέθηκε ότι αποπτωτικά κύτταρα σε ποσοστό ίσο ή πάνω από 5% στις ιστολογικές τομές είχαν οι 66.7% των ασθενών αλλά κανένας από τους φυ-σιολογικούς μάρτυρες (Ρ < 0.001). Με τη διπλή χρώση των παρασκευασμάτων βρέθηκε ότι το ποσοστό των αποπτωτικών CD15+ μυελικών προγονικών κυττάρων δεν διέφερε στατιστικά μεταξύ ασθενών και φυσιολογικών μαρτύρων, ενώ το ποσοστό των αποπτωτικών CD34+ αιμοποιητικών κυττάρων δεν ήταν δυνατό να υπολογιστεί με ακρίβεια εξ’ αιτίας της παρουσίας των CD34+ ενδοθηλιακών κυττάρων. Στατιστικά σημαντική αύξηση της απόπτωσης παρατηρήθηκε στα επιχρίσματα CD34+ και CD34+/CD33+ αλλά όχι και CD34-/CD33+ ανοσομαγνητικά διαχωρισθέντων κυττάρων των ασθενών σε σχέση με τους μάρτυρες (Ρ < 0.001, Ρ < 0.02 και Ρ > 0.05, αντίστοιχα). Τα ευρήματα μας αυτά επιβεβαιώνουν και συμπληρώνουν προηγούμενες μελέτες στο Εργαστήριό μας που έγιναν με κυτταρομετρία ροής, και υποδηλώνουν την αυξημένη πράγματι απόπτωση των CD34+ και CD34+/CD33+ κυττάρων στο μυελό των οστών των ασθενών με CIN αλλά όχι και των ωριμότερων CD34-/CD33+ και CD15+ μυελικών προβαθμίδων των ΠΜΠ. Ως τελικό συμπέρασμα υποστηρίζεται ότι η αυξημένη απόπτωση στα παραπάνω κυτταρικά διαμερίσματα ευθύνεται πιθανότατα για την ελαττωμένη παραγωγή ουδετερόφιλων κοκκιοκυττάρων στους πάσχοντες από CIN.
|
Μελέτη της απόπτωσης στους πάσχοντες από χρόνια ιδιοπαθή ουδετεροπενία του ενηλίκου (SINA) και σχέση αυτής με παραμέτρους επαγωγής και αναστολής της μυελοποίησης
