| Περίληψη |
Στην παρούσα εργασία μελετήθηκε η ανάπτυξη του πράσινου θειούχου βακτηρίου Chlorobaculum
tepidum σε θειούχα και θειοθειϊκά άλατα. Η παρουσία των αλάτων αυτών παίζει καθοριστικό ρόλο στην
ανάπτυξη του βακτηρίου, καθώς τις χρησιμοποιεί ως δότες ηλεκτρονίων στην διαδικασία της
αναερόβιας φωτοσύνθεσης. Κατά την οξείδωση των θειούχων και των θειοθειϊκών αλάτων, παράγεται
ως ενδιάμεσος μεταβολίτης το στοιχειακό θείο σε μορφή σφαιριδίων, το οποίο και εκκρίνεται στο
εξωκυττάριο περιβάλλον. Το βακτήριο χρησιμοποιεί το στοιχειακό θείο ως δότη ηλεκτρονίων, όταν
έχουν εξαντληθεί οι άλλες πηγές θείου. Οι μηχανισμοί με του οποίους δημιουργούνται και διασπώνται
τα σφαιρίδια αυτά δεν είναι γνωστοί.
Μελετήθηκε η ανάπτυξη του βακτηρίου κάτω από δύο διαφορετικές συνθήκες όσον αφορά στην πηγή
του θείου, και συγκεκριμένα στην πρώτη χρησιμοποιήθηκαν θειούχα και θειοθειϊκά άλατα, ενώ στην
δεύτερη μόνο θειούχα άλατα. Όλες οι καλλιέργειες αναπτύχθηκαν αναερόβια, στους 49°C, υπό πλήρη
φωτισμό. Με σκοπό τον προσδιορισμό της συγκέντρωσης της βακτηριοχλωροφύλλης και των
μεταβολιτών S0 και SO42-, χρησιμοποιήθηκαν διάφορες φασματοφωτομετρικές και αναλυτικές μέθοδοι.
Αυτό που παρατηρήθηκε, μελετώντας την εκάστοτε συγκέντρωση της βακτηριοχλωροφύλλης σε
συνάρτηση με το χρόνο, ήταν ότι το βακτήριο αναπτυσσόταν ταχύτερα παρουσία θειούχων και
θειοθειϊκών αλάτων.
Για εκτενέστερη μελέτη του στοιχειακού θείου, αναπτύχθηκε ένα πρωτόκολλο απομόνωσής του. Το
απομωνομένο ίζημα μελετήθηκε με μεθόδους ηλεκτρονικής μικροσκοπίας και φασματομετρία μάζας,
συμπερένοντας ότι το στοιχειακό θείο εκκρίνεται με τη μορφή σφαιριδίων διαφόρων μεγεθών, σε
ορισμένες περιπτώσεις μεγαλύτερο και από το μέγεθος του βακτηρίου, και ότι πιθανόν τα σφαιρίδια
αυτά να αποτελούνται από πολλαπλά άτομα στοιχειακού θείου, τα οποία σχηματίζουν αλυσίδες. Τέλος
το απομονωμένο στοιχειακό θείο μελετήθηκε με αποδιατακτική ηλεκτροφόρηση SDS-PAGE μιας
διάστασης, ώστε να παρατηρηθεί τυχόν ύπαρξη πρωτεϊνών που να σχετίζονται με το σχηματισμό των
σφαιριδίων και τη μεταφορά τους έξω από το κύτταρο.
|
Μελέτη του εκκρινόμενου στοιχειακού θείου και πρωτεϊνών του αναερόβιου φωτοσυνθετικού βακτήριου Chlorobaculum tepidum
