| Περίληψη |
Tα νευρογόνα γονίδια, όπως αυτά που κωδικοποιούν τον υποδοχέα Notch και τον δεσμευτή Delta, παίζουν πολύ σημαντικό ρόλο στην διακυτταρική σηματοδότηση που καθορίζει την επιδερμική έναντι της νευρικής τύχης κατά την ανάπτυξη της D. melanogaster. Tο γονίδιο neuralized, ένα επιπλέον μέλος της οικογένειας των νευρογόνων γονιδίων, κωδικοποιεί μία πρωτεΐνη 754 αμινοξέων, της οποίας ο ρόλος δεν έχει διασαφηνιστεί πλήρως. O υποκυτταρικός εντοπισμός χιμαιρικών πρωτεϊνών του Neuralized με GFP ή myc στην κυτταρική μεμβράνη και στο κυτταρόπλασμα και όχι στον πυρήνα, όπως αρχικά πιστεύετο, σε συνδυασμό με την παρουσία ενός μοτίβου RING στο μόριο, που ίσως σχετίζεται με ουβικουϊτινυλίωση, υποδεικνύουν ότι η εν λόγω πρωτεΐνη λειτουργεί σε κάποιο ρυθμιστικό στάδιο στο μονοπάτι. Bιοχημικές και ιστολογικές μέθοδοι χρησιμοποιήθηκαν προκειμένου να διαπιστωθεί η επίδραση του neuralized σε βασικούς παράγοντες του σηματοδοτικού μονοπατιού, όπως ο υποδοχέας Notch και ο δεσμευτής του Delta. Aνάλυση πρωτεϊνικών εκχυλισμάτων με τη μέθοδο Western δείχνει ότι τα επίπεδα των πρωτεϊνών Delta και Notch αυξάνονται σε μεταλλαγές απώλειας λειτουργίας του γονιδίου neuralized σε έμβρυα, ενώ σε εκτοπική έκφραση του γονιδίου (με τα σύστημα UAS-Gal4) σε προνύμφες 3ου σταδίου, τα επίπεδα της πρωτεΐνης Delta ελαττώνονται. Eπιπλέον, παρουσία neuralized, παρατηρείται αλλαγή της κυτταρικής τοποθέτησης της πρωτεΐνης Delta και μεταφορά από την κυτταρική μεμβράνη σε κυστίδια αγνώστου ταυτότητας. Eπίσης, παρουσία neuralized, παρατηρείται αυξημένη σηματοδότηση μέσω Delta (σε πειράματα εκτοπικής συνέκφρασης Delta και neuralized), η οποία σχετίζεται με αυξημένη έκφραση κάτωθεν γονιδίων-στόχων του μονοπατιού, όπως το cut και το γονιδιακό σύμπλοκο E(spl). Συνεπώς, προτείνουμε ότι το neuralized επηρεάζει το Delta ή το Notch μετα-μεταγραφικά και οδηγεί σε ενίσχυση της σηματοδότησης.
|
Μελέτη της επίδρασης του νευρογόνου γονιδίου neuralized της D.melanogaster στο μηχανισμό διακυτταρικής σηματοδότησης Notch
