| Περίληψη |
H Tim12 αποτελεί μέλος της οικογένειας των μικρών Tim πρωτεϊνών και βρίσκεται στο διαμεμβρανικό χώρο του μιτοχονδρίου. Είναι απαραίτητη για τη ζωή του σακχαρομύκητα, διαδραματίζοντας σημαντικό ρόλο στη βιογένεση του οργανιδίου. Βρίσκεται περιφερικά προσδεδεμένη στην εσωτερική μιτοχονδριακή μεμβράνη, ως μέλος του συμπλόκου ένθεσης πολυτοπικών μεμβρανικών πρωτεϊνών, TIM22. Δεδομένα συνηγορούν για τη δράση της ως συνδετικού κρίκου μεταξύ του διαλυτού συμπλόκου Tim9/Tim10 - που δρα ως μοριακός συνοδός των υδρόφοβων μεταφερούμενων πρωτεϊνών και του καναλιού Tim22 το οποίο τις ενθέτει στην εσωτερική μιτοχονδριακή μεμβράνη. Ο ακριβής, όμως, ρόλος της Tim12 κατά την είσοδο και συγκρότηση των προ-πρωτεϊνών στη μεμβράνη παραμένει άγνωστος. Για τον χαρακτηρισμό της πρωτεΐνης Tim12 του σακχαρομύκητα, μελετήθηκαν μεταλλάγματα έλλειψης περιοχών στα άκρα του πρωτεϊνικού μορίου, ώστε να ταυτοποιηθούν περιοχές σημαντικές για τη βιογένεση ή/και τη λειτουργία του. Τα τέσσερα μεταλλάγματα έλλειψης που δημιουργήθηκαν δεν φαίνεται να επηρεάζουν την είσοδο και υπομιτοχονδριακή στόχευση της Tim12. Το μετάλλαγμα έλλειψης 39 αμινοξέων από το καρβοξυτελικό άκρο της Tim12 είναι θνησιγόνο, καθώς δεν μπορεί να συμπληρώσει το φαινότυπο έλλειψης της ενδογενούς πρωτεΐνης, ενώ μεταλλάγματα με περισσότερο ακραίες ελλείψεις δεν προκαλούν πρόβλημα στην επιβίωση των κυττάρων. Επιπρόσθετα, το μετάλλαγμα αυτό φαίνεται να επηρεάζει την αλληλεπίδραση της Tim12 με την Tim9, σε in vitro πειράματα. Σε αντίθεση με τα μεταλλάγματα ακραίων ελλειψεων, πιο εσωτερικές του μορίου ελλείψεις καταργούν την ικανότητα της πρωτεΐνης να αλληλεπιδρά με τις μεμβράνες λιποσωμάτων. Η φυσιολογική σημασία, όμως, της ικανότητας αυτής της Tim12 να αλληλεπιδρά με τη λιπιδική διπλοστιβάδα της εσωτερικής μιτοχονδριακής μεμβράνης δεν είναι ξεκάθαρη. Φαίνεται ότι περιοχές κοντά στα άκρα του πρωτεϊνικού μορίου είναι σημαντικές και μάλιστα η περιοχή κοντά στο καρβοξυτελικό άκρο εμφανίζεται απαραίτητη για τη λειτουργία της Tim12.
|
Λειτουργικός χαραρακτηρισμός της πρωτεϊνης Tim12 του Sacharomyces cerevisiae
