|
Κωδικός Πόρου |
000363348 |
Τίτλος |
Ταυτοποίηση νέων πρωτεϊνών που αλληλεπιδρούν με την Chk1 κατά την ενεργοποίηση του spindle checkpoint |
Άλλος τίτλος |
Identification of novel Chk1 interacting proteins in the spindle checkpoint |
Συγγραφέας
|
Περάκη, Ιωάννα
|
Σύμβουλος διατριβής
|
Ζάχος, Γιώργος
Τζαμαρίας, Δημήτρης
Χαλεπάκης, Γιώργος
|
Περίληψη |
Το spindle checkpoint σταματά την έναρξη της ανάφασης όταν τα χρωμοσώματα δεν έχουν διαταχθεί στο ισημερινό επίπεδο με ακρίβεια και προστατεύει από λάθη στο διαχωρισμό των χρωμοσωμάτων. Ενεργοποιείται όταν οι μικροσωληνίσκοι δεν έχουν προσδεθεί στους κινητοχώρους ή όταν υπάρχει λάθος τάση ανάμεσα στους αδελφούς κινητοχώρους. H Chk1 έχει καλά χαρακτηρισμένους ρόλους στο σημείο ελέγχου του κυτταρικού κύκλου το οποίο επάγεται από βλάβες του DNA (DNA damage checkpoint) ωστόσο ο ακριβής ρόλος της Chk1 και τα πιθανά υποστρώματά της στο spindle checkpoint δεν έχουν πλήρως περιγραφεί. Για να ανιχνεύσουμε πρωτεΐνες με τις οποίες αλληλεπιδρά η Chk1 στο spindle checkpoint παρουσία ταξόλης σε κύτταρα σπονδυλοζώων χρησιμοποιήσαμε δύο προσεγγίσεις. α) Με τη μέθοδο της χημικής γενετικής ελέγξαμε εάν κύτταρα κοτόπουλου DT40 Chk1as, τα οποία εκφράζουν πρωτεΐνη Chk1 ευαίσθητη σε αναστολή από τις ογκώδεις χημικές ενώσεις ΝΜ-ΡΡ1 και 3ΜΒ-ΡΡ1, μπορούν να χρησιμοποιηθούν για την ανεύρεση νέων υποστρωμάτων της Chk1 στο G2/M DNA damage και στο spindle checkpoint, β) Απομονώσαμε εκχύλισμα μιτωτικών ατράκτων από κύτταρα ανθρώπου HeLa μετά από επώαση με ταξόλη και ανιχνεύσαμε πρωτεΐνες που αλληλεπιδρούν με την Chk1 μετά από ανοσοκατακρήμνιση. Δείξαμε ότι: α) Τα κύτταρα DT40 Chk1as δύνανται να χρησιμοποιηθούν για την ανεύρεση νέων υποστρωμάτων της Chk1 στο G2/M DNA damage αλλά όχι στο spindle checkpoint, β) Ανιχνεύσαμε πρωτεΐνες που πιθανά αλληλεπιδρούν με την Chk1 με μοριακά βάρη περίπου 160, 105 και 75 kDa. Η ταυτοποίηση τους αναμένεται μετά από ανάλυση με φασματοσκοπία μάζας. Ανίχνευση νέων πρωτεΐνών που αλληλεπιδρούν με την Chk1 στο spindle checkpoint θα οδηγήσει στην καλύτερη κατανόηση των μηχανισμών της κυτταρικής διαίρεσης.
|
Φυσική περιγραφή |
42 σ. : χάρτ., πίν., έγχ. εικ. ; 30 εκ. |
Γλώσσα |
Ελληνικά |
Θέμα |
Chemical genetics |
|
Protein interactions |
|
Substrates |
|
Πρωτεϊνικές αλληλεπιδράσεις |
|
Υποστρώματα |
|
Χημική γενετική |
Ημερομηνία έκδοσης |
2011-03-18 |
Συλλογή
|
Σχολή/Τμήμα--Σχολή Θετικών και Τεχνολογικών Επιστημών--Τμήμα Βιολογίας--Μεταπτυχιακές εργασίες ειδίκευσης
|
|
Τύπος Εργασίας--Μεταπτυχιακές εργασίες ειδίκευσης
|
Εμφανίσεις |
295 |