E-Locus - Ιδρυματικό Καταθετήριο Πανεπιστημίου Κρήτης - Μελέτη του ΑΤΡ ως υπόστρωμα της 15-Λιποξυγενάσης-1

Αρχική Μελέτη του ΑΤΡ ως υπόστρωμα της 15-Λιποξυγενάσης-1

Αποτελέσματα - Λεπτομέρειες

[Προσθήκη στο καλάθι]

Τίτλος

Μελέτη του ΑΤΡ ως υπόστρωμα της 15-Λιποξυγενάσης-1

Άλλος τίτλος

Study of ATP as a substrate of 15-Lipoxygenase-1

Συγγραφέας

Βραχνά, Μαρία

Σύμβουλος διατριβής

Ελευθεριάδης, Νικόλαος

Περίληψη

Η 15-λιποξυγενάση-1 (15-LOX-1) είναι ένα βασικό ένζυμο στα κύτταρα των θηλαστικών, που εμπλέκεται κυρίως στο μεταβολισμό των λιπιδίων. Εντοπίζεται στο κυτταρόπλασμα του ανοσοποιητικού συστήματος και των επιθηλιακών κυττάρων και στοχεύει σε πολυακόρεστα λιπαρά οξέα όπως το αραχιδονικό και το λινολεϊκό οξύ. Καταλύοντας την οξυγόνωση των λιπαρών οξέων στη 15η θέση άνθρακα, παράγει παράγωγα υδροϋπεροξυεικοσατετραενοϊκού οξέος (HPETE), που χρησιμεύουν ως πρόδρομα μόρια όπως ως βιοδραστικοί μεσολαβητές λιπιδίων. Η σημασία της 15- LOX-1 εκτείνεται σε διάφορες φυσιολογικές και παθολογικές διεργασίες, συμπεριλαμβανομένων των φλεγμονών, της αθηροσκλήρωσης, του καρκίνου και των νευροεκφυλιστικών ασθενειών. Συνολικά, η 15-λιποξυγενάση-1 χαρακτηρίζεται ως ένα πολύπλευρο, σημαντικό ένζυμο για τον μεταβολισμό των λιπιδίων και την κυτταρική φυσιολογία, καθιστώντας το έτσι πρωταρχικό στόχο για θεραπευτικές παρεμβάσεις σε διαφορετικές παθήσεις. Στην συγκεκριμένη πτυχιακή εργασία, παρουσιάζεται αρχικά η διαδικασία ετερόλογης έκφρασης και καθαρισμού του ενζύμου και μετέπειτα εξετάζεται η ικανότητα υδρόλυσης του ΑΤΡ παράγοντας ADT και ανόργανο φώσφορο. Αφού διαπιστώθηκε η υδρόλυση ΑΤΡ από το ένζυμο και ποσοτικοποιήθηκε, εξετάστηκαν παράγοντες που πιθανώς επηρεάζουν το ποσοστό υδρόλυσης, όπως διαφορετικές συγκεντρώσεις του ΑΤΡ και του ενζύμου, ο χρόνος επώασης της αντίδρασης και η θερμική επώαση του ενζύμου σε διάφορες θερμοκρασίες. Ύστερα, διερευνήθηκε η αναστολή της καταλυτικής υδρόλυσης ΑΤΡ με τη χρήση δύο αναστολέων και η εξάρτηση της υδρόλυσης ΑΤΡ υπό την παρουσία υποστρώματος. Τέλος, μελετήθηκε η αντίδραση υδρόλυσης ΑΤΡ από το ένζυμο υπό την συνύπαρξη τόσο του υποστρώματος του ενζύμου όσο και ενός συναγωνιστικού αναστολέα.

Γλώσσα

Ελληνικά

Θέμα

ATP hydrolysis

ATP quantification

Factors affecting ATP hydrolysis

Heterologous expression

Protein purification

Ετερόλογη έκφραση

Καθαρισμός πρωτεΐνης

Παράγοντες που επηρεάζουν την υδρόλυση του ΑΤΡ

Ποσοτικοποίηση ΑΤΡ