| Περίληψη |
Η φλεγμονή είναι ο βασικός μηχανισμός προστασίας του ανοσοποιητικού
συστήματος ενάντια σε οποιαδήποτε μόλυνση ή τραυματισμό. Τα μακροφάγα
αποτελούν τους κύριους συντονιστές της έμφυτης ανοσίας, καθώς δρουν διατηρώντας
την ακεραιότητα, την ομοιοστασία και την ισορροπία σε όλους τους ιστούς. Έχουν
την ικανότητα να φαγοκυτταρώνουν, να αντιγονοπαρουσιάζουν και να
ανοσορυθμίζουν μέσω της παραγωγής κυτταροκινών και αυξητικών παραγόντων. Τα
μακροφάγα ενεργοποιούνται από φλεγμονώδη σήματα που αναγνωρίζονται από τους
TLR υποδοχείς (Toll-like receptors). Η ενεργοποίηση των μακροφάγων συνοδεύεται
από γονιδιακή ρύθμιση σε πολλαπλά επίπεδα οδηγώντας στη δημιουργία ενός ευρέως
φάσματος προ-φλεγμονωδών και αντιφλεγμονωδών καταστάσεων, γνωστών ως Μ1
και Μ2 αντίστοιχα. Είναι γνωστό ότι αυτή η πλαστικότητα των μακροφάγων
ρυθμίζεται σε επιγενετικό επίπεδο, καθώς και ότι οι διαφορετικές προσαρμογές του
μεταβολισμού επηρεάζουν το τελικό αποτέλεσμα της ανοσολογικής απόκρισης.
Η παρούσα εργασία αποσκοπεί στο χαρακτηρισμό της φλεγμονώδους κατάστασης
μακροφάγων που στερούνται της έκφρασης των Akt1 ή/και Akt2 κινασών έπειτα από
ενεργοποίηση διαφορετικής TLR σηματοδότησης. Επιπλέον, στοχεύει στη μελέτη του
επιγενετικού και μεταβολικού προφίλ των συγκεκριμένων μακροφάγων έπειτα από
ενεργοποίηση διαφορετικής TLR σηματοδότησης. Στη συγκεκριμένη μελέτη
χρησιμοποιήθηκαν πρώιμα περιτοναϊκά μακροφάγα από WT, LysMCreAkt1f/f
, Akt2-/-
και LysMCreAkt1f/f
/Akt2f/f ποντίκια σε μια σειρά πειραμάτων προσδιορισμού του
κυτταρικού μεταβολισμού, του επιγενετικού και φλεγμονώδους προφίλ τόσο πριν όσο
και μετά τη διέγερση των υποδοχέωνTLR2, TLR4 και TLR7/8.
Παρατηρήθηκε ότι κατά τη διαφορετική TLR σηματοδότηση, το φλεγμονώδες
προφίλ και των τεσσάρων Akt KO κυττάρων διαφέρει. Συγκεκριμένα, τα Akt1/Akt2
KO μακροφάγα παρουσιάζουν προ-φλεγμονώδεις ιδιότητες κατά την TLR4 και
TLR7/8 σηματοδότηση. Επιπλέον σημειώνεται θετική ρύθμιση των PHF8, PHF2 και
SIRT6 επιγενετικών γονιδίων σε μη ενεργοποιημένα Akt1/Akt2 KO μακροφάγα.
Κατά την TLR4 και TLR7/8 σηματοδότηση η PHF8 και PHF2 ρυθμίζονται αρνητικά
εξηγώντας πιθανώς την επαγωγή προ-φλεγμονωδών γονιδίων σε Akt1/Akt2 KO
μακροφάγα. Ακόμα παρατηρήθηκε μειωμένη μεταβολική δραστηριότητα (OXPHOS
και γλυκόλυση) όλων των Akt KO μακροφάγων. Τα Akt1/Akt2 KO κύτταρα σε
κατάσταση ηρεμίας εμφανίζουν μειωμένη γλυκόλυση και αυξημένη μιτοχονδριακή
βιογένεση που αποδίδεται στο ανενεργό HIF1a και στον αυξημένο pGC1a
αντίστοιχα. Η αυξημένη έκφραση της SIRT6 στα συγκεκριμένα μακροφάγα πιθανόν
εμποδίζει την στρατολόγηση του HIF1a στους υποκινητές γλυκολυτικών γονιδίων
στόχου περιορίζοντας τη γλυκόλυση. Κατά την TLR4 ενεργοποίηση οι διαθέσιμες
πηγές ενέργειας εξαντλούνται γρηγορότερα απουσία των Akt1 ή/και Akt2 ισομορφών,
ενώ κατά την TLR7/8 σηματοδότηση τα Akt1/Akt2 KO μακροφάγα ανταπεξέρχονται
στις ενεργειακές απαιτήσεις παρόλο το δυσλειτουργικό μεταβολικό φαινότυπο τους.
|
Metabolic regulation of macrophage activation
