E-Locus - Ιδρυματικό Καταθετήριο Πανεπιστημίου Κρήτης - Μελέτη χλωροφυλλικών πρωτεϊνικών συμπλόκων από θυλακοεϊδείς μεμβράνες του χλωροφύκους scenedesmus obliquus

Αρχική Μελέτη χλωροφυλλικών πρωτεϊνικών συμπλόκων από θυλακοεϊδείς μεμβράνες του χλωροφύκους scenedesmus obliquus

Αποτελέσματα - Λεπτομέρειες

[Προσθήκη στο καλάθι]

Κωδικός Πόρου

000290867

Τίτλος

Μελέτη χλωροφυλλικών πρωτεϊνικών συμπλόκων από θυλακοεϊδείς μεμβράνες του χλωροφύκους scenedesmus obliquus

Άλλος τίτλος

Study of chlorophyll protein complexes from thylakoid membranes of the green alga scendesmus obliquus

Συγγραφέας

Καντζιλάκης, Κωνσταντίνος Τρύφωνος

Σύμβουλος διατριβής

Τσιώτης, Γεώργιος

Περίληψη

Η οξυγονική φωτοσύνθεση λαμβάνει χώρα στις μεμβράνες των θυλακοειδών των κυανοβακτηρίων, των πράσινων φυκών και των ανώτερων φυτών, όπου σύμπλοκα πρωτεϊνών/χρωστικών (φωτοσύστημα ΙΙ, κυτόχρωμα b6f, φωτοσύστημα Ι και ΑΤP συνθετάση) μετατρέπουν την ηλιακή ενέργεια σε χημική. Η πρωτεομική ανάλυση των φωτοσυνθετικών αυτών πρωτεϊνικών συμπλόκων σε λειτουργική μορφή αποτελεί μία πειραματική προσέγγιση η οποία επιτρέπει τόσο δομική ταυτοποίηση όσο και λειτουργική ιχνηλάτηση σχετικά με την πλαστικότητα της μοριακής δομής και λειτουργίας του φωτοσυνθετικού μηχανισμού. Στόχος της παρούσας εργασίας είναι η λειτουργική ανάλυση καθώς και ο δομικός χαρακτηρισμός του φωτοσυνθετικού πρωτεόματoς του μονοκύτταρου χλωροφύκους Scenedesmus obliquus. Αρχικά, τα χλωροφυλλικά πρωτεϊνικά σύμπλοκα μεμβρανών από τα πράσινα άλγη Scenedesmus obliquus, απομονώθηκαν οι θυλακοειδείς μεμβράνες μετά από διαλυτοποίηση με το μη ιοντικό απορρυπαντικό dodecyl-β-maltoside και χαρακτηρίστηκαν με τη χρήση της φασματοσκοπίας ορατού, SDS-Tricine PAGE, BN-PAGE και CN-PAGE. Οι δύο τελευταίες τεχνικές ηλεκτροφόρησης συγκρίθηκαν μεταξύ τους, σχετικά με τη διαχωριστική ικανότητα τους. Στη συνέχεια, μετά από διαλυτοποίηση των θυλακοειδών μεμβρανών ακολούθησε κλασματοποίηση με διαβάθμιση ζάχαρης. Τα κλάσματα των χλωροφυλλικών πρωτεϊνών χαρακτηρίστηκαν από τη φασματοσκοπία ορατού, SDS-Tricine PAGE, BN-PAGE και τη δυναμική σκέδαση φωτός (DLS). Η μέθοδος BN-PAGEεμφάνισε την παρουσία επτά πρωτεϊνικών συμπλόκων με τα μοριακά βάρη στη σειρά 68, 118, 157, 320, 494, 828 και 955 kDa, αντίστοιχα. Περαιτέρω, η σκέδαση φωτός, αποκαλύπτει την ταυτόχρονη παρουσία μορίων διαφορετικών μεγεθών στα 3-4 nm και 6.0-7.5 nm σειράς, αντίστοιχα. Το μικρότερο μέγεθος συσχετίζεται με την υδροδυναμική ακτίνα της τριμερούς μορφής του LHCII, εκτιμώντας ότι το μεγαλύτερο μέγεθος συνδέεται με την παρουσία των κέντρων αντίδρασης του φωτοσυστήματος Ι και φωτοσυστήματος ΙΙ. Επιπλέον, οι λειτουργικές πληροφορίες σχετικά με τις πρωτεΐνες μελετήθηκαν με τη χρήση της φασματοσκοπίας μάζας (MALDI-TOF MS) από μιας λεπτομερούς χαρτογράφησης 2-D_SDS-Tricine PAGE /BN-PAGE, διαλυτοποιημένων θυλακοειδών μεμβρανών του οργανισμού Scenedesmus obliquus.

Φυσική περιγραφή

79 φύλλα : εικ. ; 30 εκ.

Γλώσσα

Ελληνικά

Θέμα

Blue native

Green native

Light scattering

Membrane proteins

Moecular size

Photosynhtetic apparatus

Scendesmus obliquus