Your browser does not support JavaScript!

Αρχική    Μελέτη της έκφρασης του Olig1 γονιδίου. Χαρτογράφηση του Olig1 υποκινητή και μελέτη της κατασταλτικής δράσης του ERF στο Olig1 γονίδιο  

Αποτελέσματα - Λεπτομέρειες

Προσθήκη στο καλάθι
[Προσθήκη στο καλάθι]
Κωδικός Πόρου 000326833
Τίτλος Μελέτη της έκφρασης του Olig1 γονιδίου. Χαρτογράφηση του Olig1 υποκινητή και μελέτη της κατασταλτικής δράσης του ERF στο Olig1 γονίδιο
Συγγραφέας Νικολάου, Κώστας
Σύμβουλος διατριβής Μαυροθαλασσίτης, Γεώργιος
Περίληψη Ο ERF (ETS-2 Repressor factor) αποτελεί παράγοντα της ETS οικογένειας μεταγραφικών παραγόντων με ισχυρή κατασταλτική δράση. Φωσφορυλιώνεται από την ενεργή ERK (pERK) μεσω δυο FxF μοτίβων που διατηρεί στο κεντρικό κομμάτι του. Η λειτουργία του είναι άμεσα εξαρτώμενη από την τοπολογία του στο κύτταρο. Σε πρωτογενής ινοβλάστες ποντικού η αποφωσφορυλιωμένη μορφή του ERF είναι αποκλειστικά πυρηνική ενώ όταν φωσφορυλιώνεται από την ERK μετατοπίζεται στο κυτταρόπλασμα όπου και παύει να καταστέλλει. Ένα πιθανό γονίδιο στόχος του ERF φαίνεται να είναι το Olig1 γονίδιο. Το Olig1 γονίδιο σχετίζεται με την διαφοροποίηση των ολιγοδενδροκυττάρων και εμπλέκεται στους μηχανισμούς μυελινοποιήσης των αξόνων στους νευρώνες. Επίσης υπερεκφράζεται σε όλους τους καρκίνους της γλοίας. Πειράματα μικροσυστοιχιών έδειξαν ότι το Olig1 γονίδιο υπερεκφράζεται στους ελλειμματικούς ως προς τον ERF ινοβλάστες κατά την 9,5 ημέρα εμβρυικής ανάπτυξης. Πειράματα ανοσοκατακρήμνισης χρωματίνης σε πρωτογενής ινοβλαστες ποντικού (MEFs) έχουν δείξει ότι ο ERF σε συνθήκη έλλειψης ορού προσδένεται με μεγαλύτερη συνάφεια στον Olig1 υποκινητή. Το ίδιο συμβαίνει και σε ποντικίσιους ινοβλάστες από κεφάλια εμβρύων ποντικών ημέρας 13,5 οπου φάνηκε ότι σε συνθήκη έλλειψης ορού για 4 ώρες ο ERF προσδένεται με υψηλότερη συνάφεια κατά 1,8 φορές συγκριτικά με την κανονική συνθήκη, παράλληλα τα mRNA επίπεδα του Olig1 δεν φάνηκαν να επηρεάζονται αισθητά. Η έκφραση του Olig1 γονιδίου παρουσίασε διαφορά μεταξύ ποντικίσιων ινοβλαστών από έμβρυα ποντικού 10,5 και 13,5 ημέρας εμβρυϊκής ανάπτυξης, κατά την πρόοδο της ανάπτυξής τους σε in vitro καλλιέργεια. Στους πρωτογενής ινοβλάστες από κεφάλια εμβρύου ποντικού 13,5 ημέρας εμβρυϊκής ανάπτυξης φάνηκε ότι κατά το πρώτο πέρασμα των κυττάρων σε καλλιέργεια η έκφραση του Olig1 μειώθηκε σε συνθήκη έλλειψης ορού για 4 ώρες συγκριτικά με την κανονική συνθήκη. Αντιθέτως στα ίδια κύτταρα κατά το τρίτο πέρασμα τους η έκφραση του Olig1 σε συνθήκη έλλειψης ορού για 4 ώρες οριακά αυξήθηκε συγκριτικά με την κανονική συνθήκη. Στα MEFs κατά την 10,5 ημέρα εμβρυϊκής ανάπτυξης φαίνεται να συμβαίνει το ακριβώς αντίθετο συγκριτικά με αυτά της 13,5 ημέρας. Κατά το πρώτο πέρασμά τους σε συνθήκη έλλειψης ορού για 4 ώρες η έκφραση του Olig1 είναι υψηλότερη συγκριτικά με αυτή της κανονικής συνθήκης ενώ κατά το τρίτο πέρασμα μικρότερη. Πειράματα διαμολύνσεων σε REF1 κύτταρα έδείξαν ότι ο ERF καταστέλλει το γονίδιο αναφοράς στο οποίο έχει κλωνοποιηθεί ο Olig1 υποκινητής. Ο μεταλλαγμένος ERF σε όλα τα σημεία φωσφορυλίωσης και αποκλειστικά πυρηνικός καταστέλλει σε πολύ μεγαλύτερο βαθμό. Επι παρουσία τριχοστατίνης η κατατολή διατηρείται αλλα σε μικρότερο βαθμό. Πειράματα διαμόλυνσης ίδιου τύπου σε 3 διαφορετικά τμήματα του Olig1 υποκινητή έδειξαν πως μια πολύ υψηλά συντηρημένη περιοχή με τον άνθρωπο μήκους 245 βάσεων ανοδικά του σημείου έναρξης της μεταγραφής παρουσιάζει την ίδια ακριβώς ενεργότητα συγκριτικά με ολόκληρο τον υποκινητή. Ταυτόχρονα σε όλα τα τμήματα του υποκινητή που κλωνοποιήθηκαν η καταστολή του ERF και Μ1-7 παρουσιάστηκε στην ίδια αναλογία. Μεταλλαγή της μοναδικής ETS αλληλουχίας που υπάρχει εντός της συντηρημένης με τον άνθρωπο περιοχής διατήρησε την ίδια ακριβώς καταστολή συγκριτικά με τον αγρίου τύπου υποκινητή. Η μεταλλαγή αυτή ανεξάρτητα από το ότι δεν επηρέασε καθόλου την καταστολή από τον ERF, ελάττωσε την ενεργότητα του υποκινητή κατά 30-50% περίπου.
Φυσική περιγραφή 69 σ. : εικ. ; 30 εκ.
Γλώσσα Ελληνικά
Ημερομηνία έκδοσης 2008-04-07
Συλλογή   Σχολή/Τμήμα--Σχολή Επιστημών Υγείας--Τμήμα Ιατρικής--Μεταπτυχιακές εργασίες ειδίκευσης
  Τύπος Εργασίας--Μεταπτυχιακές εργασίες ειδίκευσης
Σημειώσεις Διατμηματικό πρόγραμμα μεταπτυχιακών σπουδών:" Μοριακή Βιολογία - Βιοϊατρική"
Εμφανίσεις 89

Ψηφιακά τεκμήρια
No preview available

Προβολή Εγγράφου
Εμφανίσεις : 1