E-Locus - Ιδρυματικό Καταθετήριο Πανεπιστημίου Κρήτης - Μελέτη της Ν- Γλυκοζυλίωσης της πρωτεϊνης BRI2 που εμπλέκεται στις οικογενείς άνοιες τύπου Βρετανίας και τύπου Δανίας

Αρχική Μελέτη της Ν- Γλυκοζυλίωσης της πρωτεϊνης BRI2 που εμπλέκεται στις οικογενείς άνοιες τύπου Βρετανίας και τύπου Δανίας

Αποτελέσματα - Λεπτομέρειες

[Προσθήκη στο καλάθι]

Κωδικός Πόρου

000378626

Τίτλος

Μελέτη της Ν- Γλυκοζυλίωσης της πρωτεϊνης BRI2 που εμπλέκεται στις οικογενείς άνοιες τύπου Βρετανίας και τύπου Δανίας

Άλλος τίτλος

Study of glycosylation of BRI2 protein which iw involved in familiar british and danish dementias

Συγγραφέας

Σερλιδάκη, Δέσποινα

Σύμβουλος διατριβής

Ευθυμιόπουλος, Σπύρος

Μέλος κριτικής επιτροπής

Κονσούλας, Χρήστος
Στεφανής, Λεωνίδας

Περίληψη

Η BRI2 (Itm2b) είναι μία τύπου ΙΙ διαμεμβρανική πρωτεϊνη. Διαφορετικές μεταλλαγές της πρωτεϊνης αυτής συνδέονται με δύο σπάνιες νευροεκφυλιστικές νόσους, τις οικογενείς άνοιες τύπου Βρετανίας (FBD) και τύπου Δανίας (FDD), οι οποίες εμφανίζουν αξιοσημείωτες νευροπαθολογικές ομοιότητες με τη νόσο του Alzeimer (AD). Οι δύο μεταλλαγμένες μορφές της πρωτεϊνης, όταν υπόκεινται σε πρωτεολυτική επεξεργασία από τη φουρίνη, έχουν ως αποτέλεσμα την παραγωγή αμυλοειδικών πεπτιδίων που συσσωρεύονται στους εγκεφάλους των ασθενών. Η λειτουργία της BRI2 δεν έχει ακόμα αποσαφηνιστεί. Ανάλυση της αμινοξικής αλληλουχίας της πρωτεϊνης υπέδειξε μια πιθανή θέση Ν-γλυκοζυλίωσης στην ασπαραγίνη 170. Διάφορες μελέτες έχουν δείξει ότι η Ν-γλυκοζυλίωση παίζει μεταξύ άλλων σημαντικό ρόλο στη σωστή αναδίπλωση, σταθεροποίηση, ενδοκυτταρική μετακίνηση και στόχευση, πρωτεόλυση και βιολογική δραστηριότητα μιας πρωτεϊνης. Για να κατανοήσουμε τις ιδιότητες της BRI2, μελετήσαμε την Ν-γλυκοζυλίωση της και τον πιθανό της ρόλο στην έκφραση της BRI2 στην κυτταρική επιφάνεια, τον υποκυτταρικό εντοπισμό και την πρωτεολυτική της επεξεργασία. Με τη χρήση ενός αναστολέα της Ν-γλυκοζυλίωσης δείξαμε αρχικά ότι πράγματι η BRI2 Ν-γλυκοζυλιώνεται. Στη συνέχεια, δημιουργώντας μεταλλαγή της ασπαραγίνης 170 σε αλανίνη, επιβεβαιώσαμε ότι αυτή είναι η μοναδική θέση Ν-γλυκοζυλίωσης της πρωτεϊνης. Η μεταλλαγμένη αυτή΄μορφή της BRI2 χρησιμοποιήθηκε για τις επακόλουθες πειραματικές διαδικασίες. Με πειράματα βιοτινυλίωσης και pulse-chase με 35S, παρατηρήσαμε ότι παρόλο που και οι δύο μορφές της πρωτείνης φτάνουν στην κυτταρική επιφάνεια, η μεταλλαγμένη μορφή εμφανίζεται σε μικρότερη ποσότητα και με πιο αργό ρυθμό. Επίσης, με τη χρήση BRI2 πρωτεϊνών σημασμένων με YFP, παρατηρήθηκε και μικροσκοπικά ότι η μη Ν-γλυκοζυλιωμένη BRI2 συσσωρεύεται ενδοκυτταρικά και εμφανίζεται μειωμένη στην κυτταρική επιφάνεια. Τέλος, εξετάζοντας τα επίπεδα του εκκρινόμενου πεπτιδίου, που παράγεται από την πρωτεολυτική επεξεργασία της BRI2 από την φουρίνη, υποδείξαμε ότι η Ν-γλυκοζυλίωση δεν είναι σημαντική για την πρωτεολυτική επεξεργασία της BRI2. Τα αποτελέσματ αυτά συμβάλλουν στη μελέτη των φυσιολογικών λειτουργιών και ιδιοτήτων της BRI2, οι οποίες είναι σημαντικές για την αποσαφήνιση των παθολογικών μηχανισμών που οδηγούν στην νευροεκφύλιση.

Φυσική περιγραφή

75 σ. : πιν. ; 30 εκ.

Γλώσσα

Ελληνικά

Θέμα

Alzheimer Disease

BRI2

Central Nervous System Diseases

Familiar British dementia

Familiar Danish dementia

Glycosylation

Γλυκοζυλίωση