Περίληψη |
Μέθοδοι που μπορούν να μελετήσουν αλληλεπιδράσεις μεταξύ υποδοχέων στην επιφάνεια κυττάρων και των προσδετών τους θα είναι μεγάλης χρησιμότητας στη σύγχρονη βιολογική έρευνα, καθώς θα μπορούν να βοηθήσουν στη μελέτη σημαντικών αλληλεπιδράσεων που συμβαίνουν in vivo ανάμεσα σε διαλυτά και μεμβρανικά μόρια αλλά και ανάμεσα σε κύτταρα. Στην παρούσα εργασία, έγινε χρήση ενός ακουστικού βιοαισθητήρα τύπου Love και ενός οπτικού βιοαισθητήρα SPR για τη μελέτη της αλληλεπίδρασης ενός μορίου στη μεμβράνη κυττάρου, του τάξης Ι μορίου MHC, HLA-A2, με ένα ειδικό για αυτό μονοκλωνικό αντίσωμα, ακινητοποιημένο στις επιφάνειες των βιοαισθητήρων. Η ειδική αλληλεπίδραση των κυττάρων με την επιφάνεια του ακουστικού βιοαισθητήρα τύπου Love έχει ως αποτέλεσμα τη μεταβολή του σήματος συναρτήσει του αριθμού των αλληλεπιδράσεων HLA IgG που συμβαίνουν ανάμεσα στην κυτταρική μεμβράνη και την επιφάνεια του αισθητήρα. Από τις καμπύλες δέσμευσης πραγματικού χρόνου, κατέστη δυνατός ο υπολογισμός της σταθεράς ισορροπίας καθώς και των σταθερών ταχύτητας για τις αντιδράσεις δέσμευσης και διαχωρισμού αφενός για ολόκληρα κύτταρα και αφετέρου για μεμονωμένα μόρια HLA-A2 στη μεμβράνη του κυττάρου που αλληλεπιδρούν με το ακινητοποιημένο αντίσωμα. Η πειραματική διάταξη με οπτικό βιοαισθητήρα τύπου SPR δεν κατάφερε να προσφέρει κάτι παρόμοιο. Η παρούσα εργασία είναι η πρώτη επιτυχημένη απόπειρα μελέτης και χαρακτηρισμού ειδικών αλληλεπιδράσεων ολόκληρων κυττάρων με υπόστρωμα με τη χρήση βιοαισθητήρα.
|