Your browser does not support JavaScript!

Αρχική    In vivo distribution of Mena in postnatal CNS synapses  

Αποτελέσματα - Λεπτομέρειες

Προσθήκη στο καλάθι
[Προσθήκη στο καλάθι]
Κωδικός Πόρου 000451459
Τίτλος In vivo distribution of Mena in postnatal CNS synapses
Άλλος τίτλος In vivo κατανομή της Mena σε συνάψεις του μεταγεννητικού ΚΝΣ (Κεντρικό Νευρικό Σύστημα)
Συγγραφέας Λινάρδου, Νίκη Θ.
Σύμβουλος διατριβής Βιδάκη, Μαρίνα
Μέλος κριτικής επιτροπής Καραγωγέως, Δόμνα
Σιδηροπούλου, Κυριακή
Περίληψη Τα νευρωνικά δίκτυα αποτελούν ίσως τους πιο πολύπλοκους και περίπλοκους σχηματισμούς ενός οργανισμού. Λόγω των συχνά εκτεταμένων διαστάσεών τους, κυτταρικά διαμερίσματα όπως οι άξονες, οι δενδρίτες και οι συνάψεις είναι πιθανό να βρίσκονται σε σημαντική απόσταση από το κυτταρικό σώμα. Ωστόσο, τα συγκεκριμένα κυτταρικά διαμερίσματα εξακολουθούν να περιέχουν τη συντριπτική πλειονότητα του κυτταροπλάσματος και είναι υπεύθυνα για πολλές και ποικίλες λειτουργίες. Προκειμένου να διατηρήσουν τη νευρωνική ομοιόστασή τους, η ικανότητα ταχείας απόκρισης σε ενδοκυτταρικά και εξωκυτταρικά ερεθίσματα πρέπει να διατηρείται ανεξάρτητα για τα διάφορα νευρωνικά διαμερίσματα. Η τοπική μεταφορά και η τοπική μετάφραση του mRNA είναι μερικοί από τους μηχανισμούς που επιτρέπουν αυτή τη χωροχρονική ρύθμιση. Αν και ο ακριβής μοριακός μηχανισμός της τοπικής μετάφρασης του mRNA παραμένει σε μεγάλο βαθμό άγνωστος, φαίνεται πως βασίζεται στην ημιαυτόνομη πρωτεϊνική μετάφραση του mRNA που έχει μεταφερθεί και αποθηκευτεί ειδικά σε υπονευρωνικά διαμερίσματα, σε απόκριση σε εσωτερικά και εξωτερικά ερεθίσματα. Τα ριβονουκλεοπρωτεϊνικά σύμπλοκα (RNPs) που σχηματίζονται από πρωτεΐνες που δεσμεύουν το RNA (RBPs), μόρια mRNA και άλλες ρυθμιστικές πρωτεΐνες, διαδραματίζουν κρίσιμο ρόλο στη μεταφορά, καθώς και στη ρύθμιση της τοπικής μετάφρασης αυτών των μορίων mRNA. Η τοπική μεταφορά mRNA και η επακόλουθη μετάφραση, μαζί με τη ρύθμιση του κυτταροσκελετού της ακτίνης, έχει αποδειχθεί ότι διαδραματίζουν βασικό ρόλο στην επιμήκυνση και καθοδήγηση των αξόνων, στη συναπτογένεση και στη συναπτική πλαστικότητα μετά την ανάπτυξη, μεταξύ άλλων διεργασιών. Η σημασία αυτών των δύο διεργασιών κατά τη διάρκεια της νευρωνικής ανάπτυξης αναδεικνύεται από το γεγονός ότι η απορρύθμιση τους έχει ενοχοποιηθεί για διάφορες νευροεκφυλιστικές και νευροαναπτυξιακές διαταραχές, όπως οι διαταραχές του φάσματος του αυτισμού (ASDs), το σύνδρομο Fragile X, η νωτιαία μυϊκή ατροφία (SMA) και η αμυοτροφική πλευρική σκλήρυνση (ALS). Η Mena (ENAH) ανήκει στην πρωτεϊνική οικογένεια Ena/VASP και εκφράζεται σε μεγάλο βαθμό στο νευρικό σύστημα. Προηγούμενες μελέτες του εργαστηρίου μας έχουν δείξει πως η Mena διαδραματίζει επίσης ρυθμιστικό ρόλο στην τοπική μετάφραση. Έχει βρεθεί πως σχηματίζει ένα ριβονουκλεοπρωτεϊνικό σύμπλοκο με τους γνωστούς μεταφραστικούς ρυθμιστές HnrnpK και PCBP1 καθώς και συγκεκριμένα μόρια mRNA στους αναπτυσσόμενους άξονες. H παρουσία της Mena βρέθηκε ότι είναι απαραίτητη για τη μετάφραση των μεταγράφων αυτών τοπικά στους άξονες. Η πρόσφατα ανακαλυφθείσα διπλή φύση της Mena εγείρει διάφορα ερωτήματα: ο γενικός της ρόλος στην αξονική τοπική μετάφραση επεκτείνεται και σε άλλα υποκυτταρικά διαμερίσματα, και συγκεκριμένα στις συνάψεις; Εξακολουθεί να αλληλεπιδρά με τους ίδιους ρυθμιστές, και αν όχι, με ποιες άλλες πρωτεΐνες αλληλεπιδρά; Η περαιτέρω διαλεύκανση του ρόλου της Mena θα μπορούσε να μας βοηθήσει να κατανοήσουμε καλύτερα διάφορες νευροαναπτυξιακές διαταραχές. Ο ποικίλος ρόλος της Mena στα υποκυτταρικά διαμερίσματα του ΝΣ παραμένει κατά το μεγαλύτερο μέρος ασύλληπτος, και έτσι, προκειμένου να μάθουμε περισσότερα γι' αυτόν, το εργαστήριό μας έχει ξεκινήσει να μελετάει το χωροχρονικό πρότυπο έκφρασής της σε όλο το αναπτυσσόμενο ΚΝΣ των ποντικών. Η παρούσα εργασία συνέχισε αυτή την προσπάθεια, προσθέτοντας δύο νέες χρονικές στιγμές μελέτης (ποντίκια P8-10 και P15) στις προϋπάρχουσες (ποντίκια P22 και 2m.o.). Συνεχίσαμε να μελετάμε τον εντοπισμό της Mena σε ολόκληρο το ΚΝΣ, χρησιμοποιώντας διαφορετικούς νευρωνικούς και συναπτικούς δείκτες, συγκρίνοντας τα ευρήματά μας με τα χρονικά σημεία που είχαν μελετηθεί προηγουμένως. Ανακαλύψαμε ενδιαφέρουσες ομοιότητες και διαφορές στις διάφορες δομές και χρονικές στιγμές του ΚΝΣ, και το πιο σημαντικό ήταν ότι μπορέσαμε να δούμε ισχυρές ενδείξεις για τον συναπτικό εντοπισμό της Mena σε δομές όπως οι στιβάδες L2/3 και L5 του φλοιού, ο ιππόκαμπος, η παρεγκεφαλίδα, ο προμήκης μυελός, ο οπίσθιος εγκέφαλος και τα σπονδυλικά νευρικά γάγγλια. Επιπλέον, δοκιμάζοντας και χρησιμοποιώντας μια μέθοδο απομόνωσης συναπτοσωμάτων, ακολουθούμενη από πειράματα συνεργατικής ανοσοκατά-κρήμνισης, μπορέσαμε να ελέγξουμε την αλληλεπίδραση της Mena στις συνάψεις με διάφορα μόρια ενδιαφέροντος: EVL, VASP, EEF2, SAFB, HNRNPK και PCBP1. Διαπιστώθηκε ότι η Mena αλληλεπιδρά με τις πρωτεΐνες EVL, VASP, EEF2 και SAFB, αλλά, παραδόξως, δεν παρατηρήθηκε καμία αλληλεπίδραση για τους παράγοντες HNRNPK και PCBP1, οι οποίοι έχει βρεθεί πως αλληλεπιδρούν με την Mena σε προηγούμενες μελέτες. Αυτό παρουσιάζει μια πολύ ενδιαφέρουσα οδό μελλοντικής μελέτης και μας οδηγεί στην θεωρία ότι το προφίλ αλληλεπίδρασης της Mena στις συνάψεις είναι αρκετά διαφορετικό από αυτό στο γενικό νευρικό σύστημα.
Φυσική περιγραφή 51 σ. : πίν., σχήμ., εικ. (μερ. εγχρ.) ; 30 εκ.
Γλώσσα Αγγλικά
Θέμα Actin cytoskeleton dynamics
Co-immunoprecipitation
EEF2
EVL
HNRNPK
Immunohistochemistry
Local mRNA translation
Mena (ENAH)
PCBP1
SAFB
Synaptoneurosome isolation
VASP
Ανοσοϊστοχημεία
Απομόνωση συναπτοσωμάτων
Δυναμική του κυτταροσκελετού της ακτίνης
Συνεργατική ανοσοκατακρήμνιση
Τοπική μετάφραση mRNA
Ημερομηνία έκδοσης 2022-11-25
Συλλογή   Σχολή/Τμήμα--Σχολή Θετικών και Τεχνολογικών Επιστημών--Τμήμα Βιολογίας--Μεταπτυχιακές εργασίες ειδίκευσης
  Τύπος Εργασίας--Μεταπτυχιακές εργασίες ειδίκευσης
Εμφανίσεις 17

Ψηφιακά τεκμήρια
No preview available

Κατέβασμα Εγγράφου
Προβολή Εγγράφου
Εμφανίσεις : 2