| Περίληψη |
Στα ευρύτερα πλαίσια της λειτουργικής μελέτης των πρωτεϊνών Fras1/Frem, αναζητήσαμε περιοχές πιθανούς λειτουργίας τους, διαφορετικές από την βασική μεμβράνη των επιθηλίων. Η πρωτεΐνη Frem3 είναι η μοναδική από τις πρωτεΐνες της οικογένειας που αφενός μεν συνεντοπίζεται και συμπεριφέρεται όπως τα υπόλοιπα μέλη της οικογένειας, αφετέρου δε παρουσιάζει και διαφορετικό πρότυπο εντοπισμού. Συγκεκριμένα, περιβάλλει τα εμβρυικά επιθήλια όπως οι υπόλοιπες πρωτεΐνες της οικογένειας, και επιπλέον, εντοπίζεται σε όλα τα αιμοφόρα αγγεία, περιφερικά νεύρα και κύτταρα του αίματος και στη βασική μεμβράνη όλων των επιθηλίων στα ενήλικα άτομα.
Με στόχο την κατανόηση της βιολογικής λειτουργίας της Frem3, πραγματοποιήθηκε η στοχευμένη απενεργοποίηση του γονιδίου Frem3 στον ποντικό με τη μέθοδο του ομόλογου ανασυνδυασμού σε συνεργασία με τον Dr. Kamal Chowdhury (Max Planck Institute, Goettingen, Γερμανία).
Από διασταυρώσεις μεταξύ ετεροζυγωτών δεν έχουν εντοπιστεί ζώντα ομόζυγα άτομα από την εμβρυική ημέρα 4.5 (Ε4.5) και αργότερα. Η Ε4.5 οριοθετεί το στάδιο της εμφύτευσης του εμβρύου στη μήτρα και είναι πιθανόν τα Frem3-/- έμβρυα να πεθαίνουν στο στάδιο της βλαστοκύστης. Η μελέτη και ανάλυση των μεταλλαγμένων ετεροζυγωτών ποντικών παρουσιάζει μια πληθώρα συμπτωμάτων όπως, φαινοτυπικά χαρακτηριστικά αλωπεκίας, ιχθύωσης, δερματίτιδας, ορχίτιδας και επιδιδυμίτιδας και κατά συνέπεια στειρότητα στα αρσενικά. Τα φαινοτυπικά αυτά χαρακτηριστικά είναι ενδεικτικά για ένα γενικό μηχανισμό αυτοανοσίας, για την επιβεβαίωση του οποίου θα πρέπει να διεξαχθούν συγκεκριμένα πειράματα, με στόχο την ακριβή ταυτοποίηση των μηχανισμών μέσω των οποίων η μερική έλλειψη της Frem3 συμβάλλει στις παραπάνω διαταραχές.
Όσον αφορά την πρωτεΐνη Fras1, το έναυσμα για την εκτενέστερη μελέτη της, αποτέλεσαν πειράματα mRNA in situ σε εγκεφάλους ενηλίκων ποντικών, απ’ όπου αναδείχθηκε η έκφραση του Fras1 σε συγκεκριμένες περιοχές που σχετίζονται με μαθησιακές διεργασίες, παρόλο που, μέχρι τώρα έχει σταθεί αδύνατο να εντοπιστεί η πρωτεΐνη σε εγκεφάλους. Πειράματα συμπεριφοράς στα μεταλλαγμένα Fras1-/- ποντίκια απέδειξαν ότι τα ποντίκια αυτά έχουν ελλιπή μνήμη του φόβου, ενώ ανοσοϊστοχημική ανάλυση με τη χρήση διαφόρων δεικτών δείχνει διαταραχές στον αριθμό γλοιακών κυττάρων.
|
Διερεύνηση του ρόλου των πρωτεινών Fras1/Frem εκτός της βασικής μεμβράνης των επιθηλίων
