Περίληψη |
Κατά τη διάρκεια της διαφοροποίησης των εμβρυϊκών βλαστοκυττάρων του ποντικού, τα επίπεδα έκφρασης των γονίδιων που ευθύνονται για την πολυδυναμία και την αυτό-ανανέωση των κυττάρων τους μειώνονται. Ανάμεσα στους παραπάνω παράγοντες, στους οποίους συγκαταλέγονται και οι τρεις σημαντικοί ρυθμιστές Nanog, Oct4 και Sox2, βρέθηκαν δυο γονίδια τα οποία παρουσιάζουν σημαντική ,καταστολή της έκφρασης τους το Sall1 και το Nr0b1.
Το Sall1 είναι ένας μεταγραφικός παράγοντας που περιέχει πολλά δάκτυλα ψευδαργύρου, δρα ως ισχυρός καταστολέας της μεταγραφής πολλών γονιδίων στα κύτταρα των θηλαστικών και είναι απαραίτητος για την ανάπτυξη του νεφρού. Μεταλλαγές στο ανθρώπινο γονίδιο, ευθύνονται για το σύνδρομο Townes-Brocks.
Το γονίδιο Nrob1 ή αλλιώς Dax1 κωδικοποιεί μια πρωτεΐνη, μέλος της οικογένειας των ορφανών πυρηνικών υποδοχέων, που παρουσιάζει δράση συν καταστολέα της μεταγραφής πολλών γονιδίων. Και τα δυο γονίδια βρέθηκε ότι είναι στόχοι του Nanog στα εμβρυϊκά βλαστοκύτταρα.
Η ταυτόχρονη μείωση των επιπέδων έκφρασης κατά τη διαφοροποίηση των Sall1 και Nrob1 με αυτή των τριών σημαντικών ρυθμιστών Nanog, Oct4 και Sox2, αυξάνει την πιθανότητα να υπάρχει κάποια λειτουργική σχέση μεταξύ τους.
Στη μεταπτυχιακή αυτή διατριβή με τη εφαρμογή in vitro και in vivo τεχνικών δείξαμε, ότι το Sall1 και Nrob1 αλληλεπιδρούν με τους τρεις σημαντικοί ρυθμιστές. Επίσης χρησιμοποιώντας την in vitro τεχνική GST pull-down, δείξαμε ότι πιθανά να αλληλεπιδρούν ταυτόχρονα και με τους δυο παράγοντες Nanog, Sox2.
Στη συνέχεια προκειμένου να μελετήσουμε ποιες περιοχές των πρωτεϊνικών μορίων που ευθύνονται για αυτές τις πιθανές διπλές αλληλεπιδράσεις, χρησιμοποιήσαμε μόνο την αμινοτελική περιοχή του Sall1 (1-2024nt), και βρήκαμε ότι αυτή η περιοχή αλληλεπιδρά με τον Nanog αλλά όχι με τον Oct4 ή τον Sox2.
Τα αποτελέσματα μας υποστηρίζουν την υπόθεση ότι το σύμπλοκο των μεταγραφικών παραγόντων που απαιτούνται για τη διατήρηση της πολυδυναμίας και την αυτό-ανανέωση των βλαστοκκυττάρων, είναι πολύ πιθανό να περιλαμβάνει και τους παράγοντες Sall1 και Nrob1.
|