Περίληψη |
Η ανάπτυξη του ανοσοποιητικού συστήματος και η ανοσολογική απάντηση του ξενιστή στις μικροβιακές μολύνσεις, βασίζεται στη μεταγραφική ενεργοποίηση και τη σίγηση ποικίλων γονιδίων. Χρησιμοποιώντας τα CD4+ Τ λεμφοκυττάρα βοηθούς, εστιαστήκαμε στη μελέτης της μεταγραφικής ρύθμισης των γενετικών τόπων της Ιντερφερόνης γ (IFNγ, χρωμόσωμα ποντικού 10), του υποδοχέα 1 της Ιντερφερόνης, (IFNγR1, χρωμόσωμα ποντικού 10) και του υποδοχέα 2 της Ιντερφερόνης (IFNγR2, χρωμόσωμα ποντικού 16). Ο στόχος της παρούσας εργασίας ήταν η διερεύνηση της συρρύθμισης στο γενωμικό επίπεδο των γονιδίων μίας κυτοκίνης και των υποδοχέων της. Πειράματα DNA-FISH έδειξαν ότι υπάρχει μια μονοαλληλική αλληλεπίδραση των γενετικών τόπων της IFNγ και του IFNγR1 στους κυτταρικούς τύπους όπου τα παραπάνω γονίδια εκφράζονται, όπως στα άωρα και στα TH1 CD4+ Τ λεμφοκύτταρα. Επιπλέον, οι γενετικοί τόποι της IFNγ και του IFNγR2 συνεντοπίζονται στα TH2 κύτταρα. Ο έλεγχος της έκφρασης των IFNγ και IFNγR1 γονιδίων στο επίπεδο του ενός κυττάρου, φανέρωσε ότι η IFNγ εκφράζεται και από τα δύο αλληλόμορφα στα TH1 κύτταρα, ενώ ο IFNγR1 μόνο από το ένα αλληλόμορφο στα άωρα και στα TH1 κύτταρα και πιο συγκεκριμένα από εκείνο που συνεντοπίζεται με το αλληλόμορφο της IFNγ. Συνεπώς, η προσέγγιση των παραπάνω (IFNγ και IFNγR1) γενετικών τόπων έχει λειτουργική σημασία στη μεταγραφή τους, στους κυτταρικούς τύπους που πρόκειται να εκφράσουν τα παραπάνω γονίδια. Επιπρόσθετα, πειράματα ACT (Associated Chromosome Trap) στα οποία χρησιμοποιήθηκε ως ‘δόλωμα’ η περιοχή του υποκινητή του IFNγR1, έδειξαν διαφορετικό πρότυπο αλληλεπιδρώντων κομματιών ανάμεσα στα άωρα TH1 και TH2 κύτταρα. Τέλος, έγινε μία προσπάθεια ελέγχου του υπο-πυρηνικού οργανιδίου στο οποίο λαμβάνουν χώρα οι αλληλεπιδράσεις, με κύριο υποψήφιο τα μεταγραφικά εργοστάσια της RNA πολυμεράσης ΙΙ ( RNA PolII factories). Στο μέλλον, η χρήση βιοχημικών πειραματικών διαδικασιών θα μας βοηθήσει να ταυτοποιήσουμε τα πρωτεϊνικά σύμπλοκα που μεσολαβούν στη δημιουργία και διατήρηση αυτών των εσω- και δια-χρωμοσωμικών αλληλεπιδράσεων.
|