|
|
| Κωδικός Πόρου |
uch.chemistry.msc//2003touloupakis |
| Τίτλος |
Απομόνωση, χαρακτηρισμός και ακινητοποίηση του ενζύμου Αλλιινάση σε στοιβαγμένα διπλά υδροξείδια |
| Συγγραφέας |
Τουλουπάκης, Ελευθέριος
|
| Περίληψη |
Η αλλιινάση (λυάση της αλλιίνης) καταλύει την σύνθεση της αλλισίνης (S-(+)-2-propenyl-L-cysteine sulfoxide) από αλλιίνη (2-propenyl)-2-propenethiosulfinate). Η αλλισίνη είναι το κύριο βιολογικά ενεργό μόριο στο αλεσμένο σκόρδο και σε αυτό οφείλονται οι περισσότερες από τις θεραπευτικές ιδιότητες του φυτού. Η σταθερότητα της αλλιινάσης και της αλλισίνης είναι σημαντικά εξαρτώμενη από τις συνθήκες αποθήκευσης. Λόγω της αστάθειας που παρουσιάζουν τόσο το ένζυμο όσο και το κύριο προϊόν δεν είναι δυνατές οι άμεσες κλινικές δοκιμές. Ως εναλλακτική στρατηγική θα μπορούσε να γίνει χρήση του σταθεροποιημένου ένζυμου σε συνδυασμό με το υπόστρωμα σε μορφή χαπιού ή κάψουλας. Τα διαθέσιμα χάπια που βρίσκονται στην αγορά δεν έχουν μεγάλη απόδοση σε αλλισίνη και αυτό οφείλεται στην απώλεια της ενεργότητας του ένζυμου κατά την διάρκεια παρασκευής του χαπιού. Σκοπός της παρούσας εργασίας είναι η απομόνωση, ο χαρακτηρισμός και η μετέπειτα ακινητοποίηση της πρωτεΐνης αλλιινάση στα στρώματα υδροξειδίων μαγνησίου-αλουμινίου. Η πιθανή σταθεροποίηση του ένζυμου αλλιινάση σε μια βιοσυμβατή ανόργανη μήτρα, όπως τις στοιβάδες διπλών υδροξειδίων, θα βοηθούσε μακροπρόθεσμα στην ανάπτυξη κλινικών εφαρμογών. Το ένζυμο απομονώθηκε από βολβούς σκόρδου χρησιμοποιώντας διάφορες τεχνικές συμπεριλαμβανομένης της χρωματογραφίας συγγένειας. Η ισχυρή αντίδραση δυο λεκτινών με την αλλιινάση οδηγεί στον σχηματισμό συμπλόκων λεκτίνης-αλλιινάση, γεγονός που δυσκόλεψε την απομόνωση καθαρής αλλιινάση. Το καθαρό ένζυμο μελετήθηκε με μια σειρά βιοχημικών και βιοφυσικών τεχνικών. Επιτεύχθηκε παραγωγή πολυκλωνικών αντισωμάτων αντι-αλλιινάσης με σκοπό την μελέτη του ενζύμου σε άλλα βιολογικά συστήματα. Στοιβάδες διπλών υδροξειδίων μαγνησίου-αλουμινίου παρασκευάστηκαν και μελετήθηκαν με φασματοσκοπικές τεχνικές. Επιτεύχθηκε η σταθεροποίηση της αλλιινάσης σε στοιβάδες διπλών υδροξειδίων. Προκαταρκτικές αναλύσεις έδειξαν ότι το ένζυμο παρέμεινε σταθερό στην βιοσυμβατή ανόργανη μήτρα για παραπάνω από τέσσερις μήνες σε θερμοκρασία 4οC.
|
| Ημερομηνία έκδοσης |
2003-00-01 |
| Ημερομηνία διάθεσης |
2007-11-05 |
| Συλλογή
|
Σχολή/Τμήμα--Σχολή Θετικών και Τεχνολογικών Επιστημών--Τμήμα Χημείας--Μεταπτυχιακές εργασίες ειδίκευσης
|
|
|
Τύπος Εργασίας--Μεταπτυχιακές εργασίες ειδίκευσης
|
| Εμφανίσεις |
212 |
Απομόνωση, χαρακτηρισμός και ακινητοποίηση του ενζύμου Αλλιινάση σε στοιβαγμένα διπλά υδροξείδια
