| Περίληψη |
Το Parhyale hawaiensis είναι ένα θαλάσσιο καρκινοειδές, το οποίο έχει αναδειχθεί σε
ισχυρό οργανισμό-μοντέλο για τη μελέτη μοριακών και κυτταρικών μηχανισμών που
συνδέονται με την εμβρυϊκή ανάπτυξη και τις αναγεννητικές διαδικασίες. Κατά το
πρόσφατο παρελθόν, διάφορες τεχνικές οπτικής μικροσκοπίας με βάση τον
φθορισμό έχουν χρησιμοποιηθεί για τη μελέτη του Parhyale για την απόκτηση
ανατομικών περιγραφών, την ανάλυση προτύπων γονιδιακής έκφρασης και την
ανακατασκευή κυτταρικών σειρών. Με στόχο την διεύρυνση αυτής της απεικόνισης
για αυτόν τον αναδυόμενο πρότυπο οργανισμό, παρουσιάζουμε ένα χαμηλού
κόστους υβριδικό διαγνωστικό σύστημα, το οποίο ενσωματώνει τις λειτουργίες της
συνεστιακής μικροσκοπίας φθορισμού και της φωτοακουστικής μικροσκοπίας στο
πεδίο των συχνοτήτων (FDPA), καταγράφοντας ταυτόχρονα τόσο την
ακτινοβολούμενη όσο και τη μη ακτινοβολούμενη χαλάρωση των μορίων, μετά από
τη διέγερση τους από μια πηγή λέιζερ διαμορφωμένης έντασης. Αρχικά
χαρακτηρίζουμε το υβριδικό μικροσκόπιο ως προς την απόδοση παραγωγής
σήματος PA και την πλευρική χωρική ανάλυση και στη συνέχεια αξιολογούμε τις
δυνατότητές του για την in vivo απεικόνιση μη επισημασμένων και σημασμένων με
φθορισμό εμβρύων Parhyale που βρίσκονται σε διαφορετικά στάδια ανάπτυξης. Οι
υβριδικές εικόνες που πήραμε αποκάλυψαν μια αξιοσημείωτη συμπληρωματικότητα
αντίθεσης μεταξύ των δύο τρόπων απεικόνισης, παρέχοντας πολύτιμες πληροφορίες
σχετικά με τη δομή των κυττάρων, τη θέση των πυρήνων, τις κυτταρικές μεμβράνες
και την κατανομή του λεκίθου. Τα ευρήματά μας μπορούν να ανοίξουν το δρόμο για
την ευρύτερη υιοθέτηση φθηνών υβριδικών μεθόδων οπτικής και φωτοακουστικής
μικροσκοπίας στην αναπτυξιακή βιολογία, αναβαθμίζοντας σημαντικά τις
δυνατότητες των τεχνολογιών που χρησιμοποιούνται σήμερα.
|
Συνδυασμένη φωτοακουστική μικροσκοπία στο πεδίο των συχνοτήτων με συνεστιακή μικροσκοπία φθορισμού
