|
|
| Κωδικός Πόρου |
000382628 |
| Τίτλος |
Απομόνωση του ενζύμου λύαση του υδροϋπεροξειδίου των λιπαρών οξέων από φύλλα και καρπούς ελιάς |
| Άλλος τίτλος |
Isolation of the enzyne hydroderoxide lyase from olive leaves and fruits |
|
Συγγραφέας
|
Μυτιληνάκη, Ελισάβετ
|
|
Σύμβουλος διατριβής
|
Γανωτάκης, Δημήτριος Φ.
|
| Περίληψη |
Η λυάση του υδροϋπεροξειδίου των λιπαρών οξέων είναι ένα ιδιαίτερης σημασίας ένζυμο, τμήμα του μονοπατιού της λιποξυγενάσης. Σο μονοπάτι ξεκινάει με την δημιουργία υδροϋπεροξειδίων πολυακόρεστων λιπαρών οξέων από την λιποξυγενάση που αποτελούν το υπόστρωμα της HPL. Προϊόντα της αντίδρασης που καταλύει η λυάση είναι οι εξενάλη και εξανάλη, ουσίες που ανήκουν στα «πτητικά των πράσινων φύλλων» αλλά και πρόδρομες ενώσεις σημαντικών βιορυθμιστών για τα φυτά.
Στην παρούσα εργασία η HPL αρχικά απομονώθηκε από βακτηριακή καλλιέργεια Ε. Coli, οργανισμό στον οποίο η πρωτεΐνη είχε προηγουμένως υπερεκφραστεί. Ακόμα δοκιμάστηκαν δύο διαφορετικές μεθόδοι για απομόνωση της HPL από καρπούς ελιάς και μια τρίτη για απομόνωση από τα φύλλα του ίδιου φυτού.
Σε όλα τα δείγματα που απομονώθηκαν με τις διαφορετικές μεθόδους και προκειμένου να διαπιστωθεί η παρουσία της HPL διεξήχθησαν δοκιμές κινητικής παρουσία του υποστρώματος του ενζύμου 13-υδροϋπεροξείδιου του λινολεϊκού οξέος, δοκιμή ανίχνευσης προϊόντων παρουσία 2,4 δινιτρο-φαινυλυδραζίνης και ανάλυση με TLC, και τέλος ηλεκτροφόρηση PAGE-SDS. Η ταυτοποίηση του ενζύμου με φασματοσκοπία μάζας δεν κατέστει δυνατή ενώ ο προσδιορισμός της κινητικής του ενζύμου φασματομετρικά έγινε εν μέρει. Ικανοποιητικά αποτελέσματα έδωσε η δοκιμή ανίχνευσης προϊόντων ενώ πιο επιτυχημένο από τα πρωτόκολλα που δοκιμάστηκαν ήταν εκείνο που συνδύαζε αλέση του καρπού ελιάς, επωάσεις παρουσία απορρυπαντικού, διαδοχικές φυγοκεντρήσεις και καθαρισμό του φυτικού εκχυλίσματος σε κολώνα ιοντοανταλλαγής.
|
| Φυσική περιγραφή |
xvi, 64 φύλλα : χάρτ., πίν., έγχ. εικ. ; 30 εκ. |
| Γλώσσα |
Ελληνικά |
| Θέμα |
E.coli |
|
Green leaf volatiles |
|
Πτητικά πράσινων φύλλων |
| Ημερομηνία έκδοσης |
2014-03-28 |
| Συλλογή
|
Σχολή/Τμήμα--Σχολή Θετικών και Τεχνολογικών Επιστημών--Τμήμα Χημείας--Μεταπτυχιακές εργασίες ειδίκευσης
|
|
|
Τύπος Εργασίας--Μεταπτυχιακές εργασίες ειδίκευσης
|
| Εμφανίσεις |
543 |
Απομόνωση του ενζύμου λύαση του υδροϋπεροξειδίου των λιπαρών οξέων από φύλλα και καρπούς ελιάς
