|
Κωδικός Πόρου |
000363516 |
Τίτλος |
In vivo ανάλυση της φυτικής 3'-5' εξωνουκλεάσης ERL1 |
Άλλος τίτλος |
In vivo analyses of plant 3'-5' exonuclease ERL1 |
Συγγραφέας
|
Βαμβακά, Ευγενία
|
Σύμβουλος διατριβής
|
Καλαντίδης, Κρίτων
Τσαγρή, Ευθυμία
Κοτζαμπάσης, Κωνσταντίνος
|
Περίληψη |
Οι χλωροπλάστες είναι κυτταρικά οργανίδια που διατηρούν τις ιδιότητες των
προκαρυωτικών οργανισμών, λόγω της προέλευσης τους από συμβιωτικά
φωτοσυνθετικά βακτήρια, αλλά έχουν αποκτήσει και ιδιότητες ευκαρυωτικών
οργανισμών λόγω της προσαρμογής τους σε αυτό το περιβάλλον. Στα φυτά οι
χλωροπλάστες έχουν το δικό τους γονιδίωμα, το οποίο κατά την ενδοσυμβίωση
έχασε την αυτονομία του και τη πολυπλοκότητα του και πολλά γονίδια
μεταφέρθηκαν στον πυρήνα. Παρόλα αυτά κάποια γονίδια παρέμειναν στον
χλωροπλάστη και κωδικοποιούν μέρη που συμμετέχουν στη φωτοσύνθεση, στη
μεταγραφή και τη μετάφραση.
Η έκφραση των γονιδίων στα πλαστίδια είναι μια διαδικασία που ρυθμίζεται
κυρίως μετα-μεταγραφικά, και οι υπεύθυνες διαδικασίες γι’αυτό είναι το μάτισμα,
η ανανέωση, η επιδιόρθωση και η κατεργασία. Η RNA κατεργασία περιλαμβάνει τη
διάσπαση των πολυκιστρονικών μεταγράφων και την ωρίμανση των 5΄ και 3΄ άκρων
των μεταγράφων. Γενικά για τη δημιουργία ώριμων μεταγράφων απαιτείται η
δράση ριβονουκλεασών, όπως ενδοριβονουκλεάσες και εξωριβονουκλεάσες. Για το
σχηματισμό των 3΄ άκρων υπεύθυνες είναι 3’-5’ εξωνουκλεάσες, όπως η PNPase και
η RNase R1, οι οποίες συμμετέχουν και στον μεταβολισμό των ριβοσωμικών RNAs.
Στην ίδια κατηγορία ανήκουν και οι DEDD πρωτεΐνες, μέλος των οποίων
είναι και οι ERI1s, που προσδένονται σε δίκλωνα μόρια DNA/RNA και καταλύουν τα
3΄ άκρα τους. Οι ERI1s είναι πρωτεΐνες που συμμετέχουν σε μονοπάτια της σίγησης
και στην κατεργασία των ριβοσωμικών RNAs σε διάφορους οργανισμούς. Στα φυτά
δε διαφαίνεται κάποιος ξεκάθαρος ρόλος της ERL1 στο μηχανισμό της σίγησης,
αλλά έχει αποδειχθεί ότι επηρεάζει τα επίπεδα και την κατεργασία των rRNAs (5S
rRNA).
Στη παρούσα εργασία πρωταρχικός στόχος ήταν η κλωνοποίηση της ERL1
από N.benthamiana και A.thaliana, σε φορείς ώστε να υπερεκφράζεται και να
καταστέλλεται. Οι πλασμιδιακές κατασκευές ελέχθησαν για τη λειτουργικότητά
τους. Στη συνέχεια πραγματοποιήθηκε μοριακός έλεγχος συγκεκριμένων
χλωροπλαστικών γονιδίων, για την ανίχνευση αλλαγών στην έκφραση τους.
Παράλληλα δημιουργήθηκαν διαγονιδιακά φυτά N.benthamiana που να
καταστέλλουν την ERL1 και διαπιστώθηκε η λειτουργικότητα της ένθεσης σε αυτά
τα φυτά. Σκοπός ήταν η χρήση τους στις αναλύσεις των χλωροπλαστικών γονιδίων.
Ταυτόχρονα αναπτύχθηκαν διαγονιδιακά φυτά A.thaliana που να υπερεκφράζουν
και να καταστέλλουν την ERL1 και ανάλυση τους για τη μελέτη των ίδιων γονιδίων
και τη σύγκριση αυτών ανάμεσα στα δύο είδη φυτών.
|
Φυσική περιγραφή |
65 σ. : χάρτ., πίν., έγχ. εικ. ; 30 εκ. |
Γλώσσα |
Ελληνικά |
Θέμα |
Chloroplast metabolish |
|
DEDDh family |
|
Post-transcriptional processes |
|
RNA processing |
|
RNA επεξεργασία |
|
Επεξεργασία ριβοσωμικού RNA |
|
Οικογένεια DEDDh |
|
Χλωροπλαστικός μεταβολισμός |
Ημερομηνία έκδοσης |
2011-03-18 |
Συλλογή
|
Σχολή/Τμήμα--Σχολή Θετικών και Τεχνολογικών Επιστημών--Τμήμα Βιολογίας--Μεταπτυχιακές εργασίες ειδίκευσης
|
|
Τύπος Εργασίας--Μεταπτυχιακές εργασίες ειδίκευσης
|
Εμφανίσεις |
376 |