E-Locus - Ιδρυματικό Καταθετήριο Πανεπιστημίου Κρήτης - Χαρακτηρισμός της δομής και δράσης βασικών υποκινητών του αμφίποδου καρκινοειδούς Parhyale hawaiensis

Αρχική Χαρακτηρισμός της δομής και δράσης βασικών υποκινητών του αμφίποδου καρκινοειδούς Parhyale hawaiensis

Αποτελέσματα - Λεπτομέρειες

[Προσθήκη στο καλάθι]

Κωδικός Πόρου

000334431

Τίτλος

Χαρακτηρισμός της δομής και δράσης βασικών υποκινητών του αμφίποδου καρκινοειδούς Parhyale hawaiensis

Άλλος τίτλος

Characterization of core promoters structure and function in the amphipod crystacean Parhyale hawaiensis

Συγγραφέας

Κωνσταντινίδης, Νικόλαος

Σύμβουλος διατριβής

Δελιδάκης, Χρήστος

Περίληψη

Η ανάπτυξη νέων οργανισμών-μοντέλων είναι απαραίτητη για τη σύγκριση των πληροφοριών που προκύπτουν από τα ήδη διαδεδομένα μοντέλα (D. melanogaster, C. elegans, ποντίκι) και για την απόκτηση πληροφοριών σχετικά με την εξέλιξη των ειδών. Απαραίτητη προϋπόθεση είναι η ανάπτυξη γενετικών εργαλείων για το χειρισμό των οργανισμών αυτών. Σκοπός της παρούσας εργασίας είναι ο χαρακτηρισμός της δομής και της λειτουργικότητας δύο βασικών υποκινητών του αναδυόμενου οργανισμού-μοντέλου Parhyale hawaiensis για τη μετέπειτα χρήση τους σε πειράματα σταθερού μετασχηματισμού ατόμων. Xαρτογραφήθηκαν με 5’ RACE οι βασικοί υποκινητές των PhHS και PhMS στοιχείων της οικογένειας των hsp70 γονιδίων. Ταυτοποιήθηκε σε αυτά τα στοιχεία η θέση έναρξης της μεταγραφής, τα ΤΑΤΑ boxes, τα splice acceptors και τα splice donors σε σχέση με τα σημεία πρόσδεσης του HSF και των μεταγραφικών παραγόντων bHLH. Στη συνέχεια, κατασκευάσθηκαν και ενέθηκαν σε έμβρυα σταδίου ενός κυττάρου δύο πλασμιδιακές κατασκευές· αυτές έφεραν, ανάμεσα στα άκρα του μεταθετού στοιχείου Minos, ένα γονίδιο μάρτυρα (DsRed ή EGFP) υπό τον έλεγχο του ρυθμιστικού στοιχείου 3xP3 σε συνδυασμό με το βασικό υποκινητή hsp70 της Drosophila και ένα άλλο γονίδιο μάρτυρα υπό τον έλεγχο των ρυθμιστικών στοιχείων 3xP3 και DC5 σε συνδυασμό με το βασικό υποκινητή hsp70 του Parhyale. Η ανάλυση της G1 γενιάς των σταθερά μετασχηματισμένων ατόμων οδήγησε στο συμπέρασμα ότι ο βασικός υποκινητής της Drosophila δεν είναι πλήρως λειτουργικός όταν χρησιμοποιείται στο αμφίποδο εν αντιθέσει με τον ενδογενή βασικό υποκινητή. Επίσης, συγκρίθηκαν τα πρότυπα ενεργοποίησης των ρυθμιστικών στοιχείων 3xP3 και DC5 στον Parhyale hawaiensis με απώτερο σκόπο τη χρήση αυτών ως μάρτύρων σταθερού μετασχηματισμού ατόμων.

Φυσική περιγραφή

48 σ. : εικ. ; 30 εκ.

Γλώσσα

Ελληνικά

Θέμα

Drosophila

PhHS

PhMS

Ημερομηνία έκδοσης

2008-12-04

Συλλογή

Σχολή/Τμήμα--Σχολή Θετικών και Τεχνολογικών Επιστημών--Τμήμα Βιολογίας--Μεταπτυχιακές εργασίες ειδίκευσης