|
|
| Κωδικός Πόρου |
uch.biology.phd//2003spilianakis |
| Τίτλος |
Μελέτη μηχανισμών μεταγραφικής ενεργοποίησης από το συνεργοποιητή MHC των τάξης ΙΙ γονιδίων, CIITA |
| Άλλος τίτλος |
Transcriptional vegulation of MHC class II genes from the class II transactivator, CIITA |
|
Συγγραφέας
|
Σπηλιανάκης, Χαράλαμπος Γ
|
|
Σύμβουλος διατριβής
|
Παπαματθαιάκης, Ι.
|
| Περίληψη |
Στα πλαίσια της παρούσας διδακτορικής διατριβής μελετήσαμε τους μηχανισμούς ρύθμισης των τάξης ΙΙ αντιγόνων του Κυρίου Συμπλόκου Ιστοσυμβατότητας. Τα τάξης ΙΙ αντιγόνα είναι διμερείς μεμβρανικές γλυκοπρωτεΐνες με σκοπό την παρουσίαση αντιγόνων στα Τ-λεμφοκύτταρα. Η ρύθμιση της έκφρασής τους είναι αυστηρά ρυθμιζόμενη στο μεταγραφικό επίπεδο και η επαγωγή τους απαιτεί την ύπαρξη ενός ενισχυοσώματος που δημιουργείται σε συντηρημένα στοιχεία (Η,Χ,Υ) του εγκύς υποκινητή καθώς και την έκφραση του παράγοντα CIITA, που είναι και ο κύριος μεταγραφικός ενεργοποιητής των τάξης ΙΙ γονιδίων. Το CIITA μπορεί να ρυθμίζει θετικά την έκφραση των MHC τάξης ΙΙ γονιδίων αφού με την καρβοξυτελική του περιοχή στρατολογείται στο τάξης ΙΙ ενισχυόσωμα και με την αμινοτελική του περιοχή μπορεί να αλληλεπιδρά με άλλους μεταγραφικούς συνενεργοποιητές και να επάγει τη μεταγραφή. Δείξαμε οτι οι μεταγραφικοί συνενεργοποιητές CBP, pCAF και GCN5 αλληλεπιδρούν με την αμινοτελική περιοχή του CIITA τόσο in vitro όσο και in vivo και μπορούν να ρυθμίζουν θετικά την έκφραση των τάξης ΙΙ αντιγόνων. Το CIITA όχι μόνο αλληλεπιδρά με τους παραπάνω συνενεργοποιητές αλλά ακετυλιώνεται απαυτούς σε διακριτά αμινοξικά κατάλοιπα λυσινών που εδράζονται σε ένα αμινοτελικό σήμα πυρηνικού εντοπισμού. Η ακετυλίωση του CIITA έχει σαν αποτέλεσμα την αύξηση της πυρηνικής του εντόπισης και την ενδυνάμωσή του για μεταγραφική ενεργοποίηση. Η υποκυτταρική κατανομή του CIITA καθορίζεται επίσης και από γεγονότα αλληλεπίδρασής του με τον εαυτό του. Η αλληλεπίδραση του CIITA με τον εαυτό του οδηγεί σε κυτταρική ανακατανομή και λειτουργική συμπλήρωση. Ο χαρακτηρισμός του τάξης ΙΙ ενισχυοσώματος έγινε για πρώτη φορά στα πλαίσια αυτής της εργασίας χρησιμοποιώντας ανασυνδιασμένες πρωτεΐνες και όχι πρωτεϊνικά εκχυλίσματα και δείχθηκε η συνεργατικότητα στην πρόσδεση των συμπλόκων στον εγκύς υποκινητή καθώς και η εξειδίκευση στην πρόσδεση. Δείξαμε οτι το in vitro ανασυστημένο τάξης ΙΙ ενισχυόσωμα μπορεί να στρατολογεί ειδικά στον υποκινητή τόσο το CIITA όσο και άλλα μέρη της βασικής μεταγραφικής μηχανής. Χρησιμοποιώντας την τεχνική ανοσοκατακρήμνισης χρωματίνης δείξαμε την αλληλουχία στρατολόγησης των διαφόρων παραγόντων που απαιτούνται για την επαγωγή του τάξης ΙΙ DRA γονιδίου μετά την επαγωγή των κυττάρων από IFN-γ. Πολλή σημαντικό αποτέλεσμα αποτελεί η απόδειξη οτι ένας συνενεργοποιητής όπως το CIITA μπορεί να ρυθμίζει την έναρξη και επιμήκυνση της μεταγραφής ρυθμίζοντας τα επίπεδα φωσφορυλίωσης συγκεκριμένων καταλοίπων σερίνης της RNA Πολυμεράσης ΙΙ. Το σύστημα επαγωγής του γονιδίου DRA από IFN-γ είναι ένα επαγόμενο σύστημα μεταγραφής που ομοιάζει με την αλληλουχία των γεγονότων επαγωγής του γονιδίου της IFN-β μετά την προσθήκη ιού, στο ότι απαιτείται ένα ενισχυόσωμα, που στην περίπτωση των τάξης ΙΙ είναι προσχηματισμένο ενώ στην περίπτωση της IFN-β είναι επαγόμενο. Πληροφορίες που αφορούν τη μεταγραφική ρύθμιση των γονιδίων γενικότερα μπορεί να αντλήσει κανείς συγκρίνοντας τα δύο συστήματα. Πιο σημαντικό γεγονός κρίνεται όμως η προσπάθεια κατανόησης της μεταγραφής των τάξης ΙΙ γονιδίων και η προσπάθεια επαγωγής τους σε συμπαγείς όγκους όπου και η έκφραση ελλείπει.
|
| Φυσική περιγραφή |
129 σ. : εικ. ; 30 εκ. |
| Γλώσσα |
Ελληνικά |
| Θέμα |
Κύριο σύμπλοκο ιστοσυμβατότητας; Μεταγραφή; Συνενεργοποιητής τάξης ΙΙ; Σύνδρομο γυμνών λεμφοκυττάρων; Ανοσοκατακρήμνιση χρωματίνης; Πολυμεράση ΙΙ; Φωσφορυτίωση |
| Ημερομηνία έκδοσης |
2003-07-08 |
| Συλλογή
|
Σχολή/Τμήμα--Σχολή Θετικών και Τεχνολογικών Επιστημών--Τμήμα Βιολογίας--Διδακτορικές διατριβές
|
|
|
Τύπος Εργασίας--Διδακτορικές διατριβές
|
| Εμφανίσεις |
572 |
Μελέτη μηχανισμών μεταγραφικής ενεργοποίησης από το συνεργοποιητή MHC των τάξης ΙΙ γονιδίων, CIITA
