| Περίληψη |
Τα μικρο-RNAs (micro-RNAs mirs) είναι ριβονουκλεοτίδια 21-24 bp, που προκαλούν μετα-μεταγραφική σίγηση γονιδίων, η οποία ονομάζεται PTGS (post transcriptional gene silencing) στα φυτά και RNAi (RNA interference) στα ζώα. Στους ζωικούς οργανισμούς οι περιοχές πρόσδεσής τους (binding sites), στις οποίες προσδένονται με ατελή συμπληρωματικότητα, εντοπίζονται στο 3 UTR των γονιδίων. Τα μικρο-RNAs έχουν συσχετιστεί τα τελευταία χρόνια με διάφορες μορφές καρκίνου, ενώ έχει βρεθεί ότι κάποια ογκογονίδια, όπως το RAS, ρυθμίζονται από αυτά. Συγκεκριμένα, στην πλειοψηφία των περιπτώσεων Χρόνιας Λεμφοκυτταρικής Λευχαιμίας (Chronic Lymphocytic Leukemia-CLL) που οφείλεται σε έλλειψη στη χρωμοσωμική περιοχή 13q14, υπάρχει μειωμένη ποσότητα των mir15 και mir16. H αναζήτηση των γονιδίων-στόχων των mir15 και mir16, κατά τη διάρκεια πρόσφατων πειραμάτων του εργαστηρίου, οδήγησε στην ανακάλυψη μιας σειράς υποψηφίων γονιδίων. Κατά την εκπόνηση της παρούσας διατριβής μεταπτυχιακού τίτλου ειδίκευσης, τα υποψήφια γονίδια-στόχοι υποβλήθηκαν σε ανάλυση με το πρόγραμμα microInspector τόσο για να διαπιστωθεί αν αποτελούν in silico στόχους για τα παραπάνω μικρο-RNA όσο και για την εύρεση των περιοχών πρόσδεσης των mir15 και mir16 στο 3΄UTR τους. Οι περιοχές πρόσδεσης κλωνοποιήθηκαν σε φορέα έκφρασης λουσιφεράσης και πραγματοποιήθηκαν πειράματα διαμόλυνσης, από τα αποτελέσματα των οποίων φαίνεται, ότι τουλάχιστον ένα από τα γονίδια, το ογκογονίδιο Bcl2, αποτελεί πιθανό στόχο για το mir16, πληροφορία που δημοσιεύτηκε πρόσφατα από τους Cimmino και συνεργάτες (Cimmino, A. et al 2005). Η εύρεση γονιδίων-στόχων των mir15 και mir16, όπως του Bcl2, είναι σημαντική για την περαιτέρω αποσαφήνιση των αιτιών που προκαλούν την CLL.
|
Επιβεβαίωση των υποψηφίων γονιδίων-στόχων των mir15a και mir16
