E-Locus - Ιδρυματικό Καταθετήριο Πανεπιστημίου Κρήτης - Μεταπτυχιακές εργασίες ειδίκευσης

Αρχική Συλλογές Τύπος Εργασίας Μεταπτυχιακές εργασίες ειδίκευσης

Μεταπτυχιακές εργασίες ειδίκευσης

Εντολή Αναζήτησης : Συγγραφέας="Κουκουζέλης" Και Συγγραφέας="Κωνσταντίνος"

Τρέχουσα Εγγραφή: 5388 από 6511

[Προσθήκη στο καλάθι]

Κωδικός Πόρου

000419778

Τίτλος

Characterization of the molecular functions of the DNA methyltransferase 1, DNMT1 in erythropoiesis

Άλλος τίτλος

Χαρακτηρισμός των μοριακών λειτουργιών της DNA μεθυλτρανσφεράσης 1 DNMT1, στην ερυθροποίηση

Συγγραφέας

Μαυροειδή, Δήμητρα Π.

Σύμβουλος διατριβής

Στρουμπούλης, Ιωάννης

Περίληψη

Η μεθυλίωση του DNA είναι κρίσιμη για την εμβρυϊκή ανάπτυξη, καθώς και για ποικίλες βιολογικές διαδικασίες. Η DNA μεθυλτρανσφεράση DNMT1 είναι υπεύθυνη για τη διατήρηση των μοτίβων μεθυλίωσης στις θυγατρικές αλυσίδες του DNA μετά την αντιγραφή, αλλά είναι επίσης γνωστό ότι ρυθμίζει τη γονιδιακή έκφραση ως καταστολέας. Μελέτες με DNMT1 knock out/down (KO/KD) σε αιμοποιητικές σειρές ή σε ποντίκια, αποκάλυψαν ότι η DNMT1 οδηγεί τα αιμοποιητικά βλαστοκύτταρα σε μυελοερυθροειδική μοίρα. Προηγούμενες δημοσιεύσεις του εργαστηρίου μας έδειξαν ότι η DNMT1 αλληλεπιδρά με ποικίλους ερυθροειδικούς παράγοντες(GATA1, FOG-1, GFI-1b), σχηματίζοντας ένα κομβικό σύμπλοκο αποτελούμενο από την DNMT1 και τους μεταγραφικούς παράγοντες ZBP89 και ZNF143, το οποίο αλληλεπιδρά με διακριτά αιμοποιητικά πρωτεϊνικά υποσύμπλοκα. Επιπροσθέτως, η επικράτεια πρόσδεσης του PCNA στην DNMT1 ( PCNA Binding domain - PBD), αποδείχθηκε αναγκαίο και ικανό για την αλληλεπίδραση της DNMT1 με αυτούς τους μεταγραφικούς παράγοντες. Επιπλέον, πειράματα DNMT1 KD σε ερυθρολευχαιμικά κύτταρα ποντικού (murine erythroleukemic (MEL) cells), αποκάλυψαν έντονες διαταραχές στην διακοπή του κυτταρικού κύκλου, λόγω προβληματικής καταστολής των γονιδίων που ευθύνονται για τον κυτταρικό πολλαπλασιασμό. Ο βασικός σκοπός αυτής της μελέτης είναι να αποσαφηνιστεί ο ρόλος της DNMT1 στην ερυθροειδική διαφοροποίηση. Προκειμένου να επιτευχθεί αυτός ο σκοπός, δημιουργήθηκαν DNMT1 KO MEL κύτταρα με την μέθοδο CRISPR/Cas9 και επιχειρήθηκε πλήρης χαρακτηρισμός του φαινοτύπου. Τα DNMT1 KO κύτταρα παρουσίασαν φαινότυπο παρόμοιο με αυτόν των DNMT1 knockdown όσον αφορά τον κυτταρικό κύκλο και την προβληματική ερυθροειδική διαφοροποίηση. Επιπλέον μελέτες δείχνουν ότι η DNMT1 καταστέλλει την γ-σφαιρίνη σε ερυθροειδικά κύτταρα ενηλίκων μεθυλιώνοντας τον υποκινητή της. Επίσης, αρκετές μελέτες προτείνουν ότι η DNMT1 συνεργάζεται άμεσα ή έμμεσα με τον BCL11A, έναν παράγοντα που είναι γνωστό ότι ευθύνεται για την αποσιώπηση της έκφρασης των εμβρυϊκών β-σφαιρινών στο ποντίκι (εy and βh1), καθώς και της γ-σφαιρίνης στον άνθρωπο. Με βάση αυτά τα δεδομένα, διερευνήσαμε τις αλληλεπιδράσεις της DNMT1 με τον BCL11A, υποθέτοντας ότι η DNMT1 δρα ως συγκαταστολέας αυτών των γονιδίων κατά την ερυθροποίηση.

Φυσική περιγραφή

[35 σ.] : σχεδ., πίν., εικ.(μερ. εγχρ.) ; 30 εκ.

Γλώσσα

Αγγλικά

Θέμα

BCL11A

G Globin

Γ Σφαιρίνη

Ημερομηνία έκδοσης

2018-11-23

Συλλογή

Σχολή/Τμήμα--Σχολή Θετικών και Τεχνολογικών Επιστημών--Τμήμα Βιολογίας--Μεταπτυχιακές εργασίες ειδίκευσης