E-Locus - Ιδρυματικό Καταθετήριο Πανεπιστημίου Κρήτης

Αρχική Αναζήτηση

Αποτελέσματα - Λεπτομέρειες

Εντολή Αναζήτησης : Συγγραφέας="Τοκατλίδης" Και Συγγραφέας="Κωνσταντίνος"

Τρέχουσα Εγγραφή: 5 από 9

[Προσθήκη στο καλάθι]

Κωδικός Πόρου

000388602

Τίτλος

Delineating the role of autophagy in shaping the autoreactive phenotype of monocytes from patients with Systemic Lupus Erythematosus (SLE) upon IFNa signaling

Άλλος τίτλος

Ο ρόλος της αυτοφαγίας στο σχηματισμό του αυτοδραστικού φαινοτύπου των μονοκυττάρων από ασθενείς με Συστηματικό Ερυθυματώδη Λύκο (ΣΕΛ) μέσω της σηματοδότησης από ιντερφερόνη-α

Συγγραφέας

Καμπράνη, Ελένη Γ.

Σύμβουλος διατριβής

Γκιρτζιμανάκη, Κατερίνα
Βεργίνης, Παναγιώτης

Μέλος κριτικής επιτροπής

Σπηλιανάκης, Χαράλαμπος
Τοκατλίδης, Κωνσταντίνος
Θεοδωρόπουλος, Παναγιώτης

Περίληψη

Ο συστηματικός ερυθηματώδης λύκος (ΣΕΛ) είναι μια χρόνια, συστηματική αυτοάνοση διαταραχή, που κατά κύριο λόγο προσβάλει γυναίκες, στην οποία η ανοσολογική ανοχή σε αυτόλογα νουκλεϊκά οξέα και πρωτεΐνες χάνεται, με αποτέλεσμα την εμμένουσα φλεγμονή και την παραγωγή αυτοαντισωμάτων που προκαλούν ιστική βλάβη. Ο παθογενετικός ρόλος των ιντερφερονών τύπου Ι στον ΣΕΛ υποστηρίζεται από την ύπαρξη μιας “γονιδιακής υπογραφής”, ενός συνόλου γονιδίων η έκφραση των οποίων ρυθμίζεται υπό την επίδραση ιντερφερονών, στα λευκοκύτταρα του περιφερικού αίματος των ασθενών με ΣΕΛ. Επίσης, τα υψηλά επίπεδα ιντερφερόνης-α στον ορό ασθενών όπου ανιχνεύονται συμβαδίζουν με την ενεργότητα αλλά και την σοβαρότητα της νόσου. Τα αυτοδραστικά μονοκύτταρα στον ΣΕΛ χαρακτηρίζονται από τον εξαρτώμενο από ιντερφερόνη-α φαινότυπό τους και η διαφοροποίησή τους αλλά και η παρουσίαση των αυτοαντιγόνων από τις πρωτεΐνες του μείζονος σύμπλοκου ιστοσυμβατότητας τύπου ΙΙ έχει δειχθεί ότι εξαρτάται από την κυτταρική αυτοφαγία. Η αυτοφαγία είναι μια καταβολική διαδικασία του κυττάρου που περιλαμβάνει την αποικοδόμηση των περιττών και μη-λειτουργικών συστατικών του και βασίζεται στη συνεργασία των αυτοφαγοσωμάτων με τα λυσοσώματα. Σκοπός της παρούσας μελέτης είναι η διαλεύκανση του ρόλου της αυτοφαγίας στο σχηματισμό του αυτοδραστικού φαινοτύπου των μονοκυττάρων από ασθενείς με ΣΕΛ μέσω της σηματοδότησης της ιντερφερόνης-α. Γι’ αυτό το σκοπό, CD14⁺ μονοκύτταρα απομονώθηκαν από ασθενείς με ΣΕΛ αλλά και από υγιείς εθελοντές αιμοδότες και τα επίπεδα των αυτοφαγικών πρωτεϊνών LC3 και P62 αναλύθηκαν μέσω ανοσοαποτύπωσης κατά western και συνεστιακής μικροσκοπίας. Τα επίπεδα των αγγελιοφόρων RNA για τα αυτοφαγικά γονίδια ATG5 και P62 αναλύθηκαν μέσω πραγματικού χρόνου αλυσιδωτή αντίδραση πολυμεράσης. Αντίστοιχα πειράματα πραγματοποιήθηκαν και με ex vivo χειρισμό μονοκυττάρων και επώασής τους με 10% v/v ορό από ασθενείς με ΣΕΛ και υγιείς αιμοδότες αλλά και με χορήγηση ανασυνδυασμένης ιντερφερόνης-α σε συγκέντρωση 10⁴U/ml. Τα αποτελέσματα έδειξαν ότι τα μονοκύτταρα ασθενών με ΣΕΛ παρουσιάζουν αυξημένα επίπεδα αυτοφαγίας σε σχέση με τα υγιή δείγματα. Επίσης, η επώαση υγιών μονοκυττάρων με ορό από ασθενείς με ΣΕΛ ή με ανασυνδυασμένη ιντερφερόνη-α προκάλεσε την αύξηση της αυτοφαγίας. Η αντιγονοπαρουσιαστική ικανότητα των υγιών μονοκυττάρων μετά τη χορήγηση της ιντερφερόνης-α ήταν επίσης αυξημένη με βάση την έκφραση των μεμβρανικών δεικτών HLA-DR και CD-86 σε πειράματα κυτταρομετρίας ροής. Τέλος, πραγματοποιώντας πειράματα συνεστιακής μικροσκοπίας μονοκυττάρων από ασθενείς με ΣΕΛ σε σύγκριση με υγιή δείγματα αλλά και υγιών μονοκυττάρων στα οποία χορηγήθηκε ιντερφερόνη-α για διαφορετική χρονική διάρκεια, κατέδειξαν ότι η ολοκλήρωση της αυτοφαγίας είναι διαταραγμένη στο περιβάλλον της νόσου. Η μη ολοκληρωμένη καταστροφή του περιεχομένου των αυτοφαγολυσσωσομάτων αποτελεί πηγή αυτοαντιγόνων, τα οποία δεσμεύονται από το σύμπλοκο ιστοσυμβατότητας τύπου ΙΙ και μπορούν να προκαλέσουν αυτοάνοση ανοσολογική απάντηση. Είναι μείζονος σημασίας να διαλευκανθεί ένας πιθανός μηχανισμός μέσω του οποίου η ιντερφερόνη-α μπορεί να προκαλέσει απορρύθμιση της αυτοφαγίας και να οδηγήσει συνεπώς στην παραγωγή αυτοαντισωμάτων, όχι μόνο στην περίπτωση του ΣΕΛ αλλά και σε άλλα αυτοάνοσα νοσήματα. Αποκτώντας αυτή τη γνώση, πιο στοχευμένη θεραπεία μπορεί να αναπτυχθεί σε αυτές τις χρόνιες ασθένειες.

Φυσική περιγραφή

49 φύλλα : πίν., εικ ; 30 εκ.

Γλώσσα

Αγγλικά

Θέμα

Αυτοφαγία

Ιντερφερόνη-α

Μονοκύτταρα

Ημερομηνία έκδοσης

2014-11-21

Συλλογή

Σχολή/Τμήμα--Σχολή Θετικών και Τεχνολογικών Επιστημών--Τμήμα Βιολογίας--Μεταπτυχιακές εργασίες ειδίκευσης