E-Locus - Ιδρυματικό Καταθετήριο Πανεπιστημίου Κρήτης

Αρχική Αναζήτηση

Αποτελέσματα - Λεπτομέρειες

Εντολή Αναζήτησης : Συγγραφέας="Καλαντίδης" Και Συγγραφέας="Κρίτων"

Τρέχουσα Εγγραφή: 44 από 67

[Προσθήκη στο καλάθι]

Κωδικός Πόρου

000402965

Τίτλος

Λειτουργική μελέτη του ιικού καταστολέα της RNA σίγησης, CYSDV p25

Άλλος τίτλος

Functional analysis of the CYSDV p25 suppvessor of RNA silencing

Συγγραφέας

Μαλλιαράκης, Δημήτρης Ν.

Σύμβουλος διατριβής

Καλαντίδης, Κρίτων

Περίληψη

Ο crini-ιός του κίτρινου παραμορφωτικού νανισμού των κολοκυνθοειδών (Cucurbit yellow stunting disorder virus, CYSDV) προσβάλλει φυτά της οικογένειας Cucurbitaceae, προκαλώντας μεγάλες καταστροφές στις καλλιέργειές τους. Τα φυτά αυτά είναι βασικά συστατικά διατροφής για τον άνθρωπο και η παραγωγή τους συμβάλλει σημαντικά στην παγκόσμια αγροτική οικονομία. Η άμυνα των φυτών απέναντι στους ιούς επιτελείται κυρίως μέσω του μηχανισμού της RNA σίγησης. Οι περισσότεροι ιοί όμως διαθέτουν καταστολείς της RNA σίγησης που τους επιτρέπουν να αντιμετωπίζουν τον αντιικό μηχανισμό των φυτών. Ο σκοπός της παρούσας εργασίας ήταν η λειτουργική μελέτη του καταστολέα της RNA σίγησης CYSDV p25, με in vivo και in vitro πειραματικές προσεγγίσεις. Για την in vivo μελέτη του καταστολέα CYSDV p25 δημιουργήθηκαν διαγονιδιακά φυτά που υπερεκφράζουν σταθερά την πρωτεΐνη. Στα φυτά αυτά παρατηρήθηκε φαινότυπος χλώρωσης και καθυστερημένης ανάπτυξης. Αναλύσεις τύπου northern έδειξαν ότι ο καταστολέας CYSDV p25 δεν αλληλεπιδρά με το μονοπάτι της βιογένεσης των ενδογενών miRNAs miR159 και miR167. Επίσης, η σταθερή υπερέκφραση της πρωτεΐνης CYSDV p25 φάνηκε να καταστέλλει ισχυρά την S-PTGS. Η in vitro προσέγγιση περιέλαβε τον έλεγχο της ικανότητας του καταστολέα CYSDV p25 να προσδένει δίκλωνα μόρια RNA. Η αδυναμία της ετερόλογης έκφρασης της πρωτεΐνης σε βακτήρια E. Coli δεν επέτρεψε τον καθαρισμό της πρωτεΐνης και την ολοκλήρωση του in vitro πειράματος. Η μελέτη του καταστολέα CYSDV p25 είναι πιθανόν να οδηγήσει στην εύρεση ενός νέου μηχανισμού καταστολής της RNA σίγησης, λόγω της έλλειψης συντηρημένων επικρατειών και ομολογίας με ήδη μελετημένους ιούς. Η δημιουργία των CYSDV p25 διαγονιδιακών φυτών είναι ένα πρώτο βήμα που θα δώσει τη δυνατότητα διεξαγωγής σημαντικών πειραμάτων για την διερεύνηση της λειτουργίας του. Επιπλέον, τα διαγονιδιακά φυτά μπορούν να χρησιμοποιηθούν σαν "εργοστάσια" παραγωγής ετερόλογων πρωτεϊνών.

Φυσική περιγραφή

iv, 62 σ. : πίν., σχήμ., εικ. ; 30 εκ.

Γλώσσα

Ελληνικά

Θέμα

miR159

miR167

Καταστολείς σίγησης

Ημερομηνία έκδοσης

2016-11-18

Συλλογή

Σχολή/Τμήμα--Σχολή Θετικών και Τεχνολογικών Επιστημών--Τμήμα Βιολογίας--Μεταπτυχιακές εργασίες ειδίκευσης