| Περίληψη |
Σκοπός της παρούσας μελέτης ήταν η ανάπτυξη και εφαρμογή μιας μεθόδου ποιοτικής και ποσοτικής ανάλυσης μεταβολιτών των φθαλικών εστέρων σε δείγματα ανθρώπινων ούρων με χρήση υγρής χρωματογραφίας υψηλής απόδοσης συζευγμένης με διαδοχική φασματομετρία μαζών με ηλεκτροψεκασμό (HPLC-ESI-MS/MS). Οι φθαλικοί διεστέρες χρησιμοποιούνται κυρίως σαν πλαστικοποιητές (πρόσθετα στα πλαστικά), βρίσκονται σε πάρα πολλά προϊόντα όπως και επίσης μέσω αυτών εκλύονται σε μεγάλες ποσότητες στο περιβάλλον.
Ο λόγος που αναπτύχθηκε αυτή η μέθοδος είναι η μελλοντική χρήση της, στην ανάλυση, για πρώτη φορά στην Ελλάδα και από τις πρώτες στην Ευρώπη, ενός μεγάλου αριθμού δειγμάτων ανθρώπινων ούρων και εύρεση των επιπέδων των μεταβολιτών των φθαλικών εστέρων. Αυτές οι ενώσεις μπορούν να χρησιμοποιηθούν ως βιοδείκτες (biomarkers) έκθεσης σε φθαλικούς εστέρες στην περιβαλλοντική επιδημιολογία. Το ενδιαφέρον σε αυτές τις ενώσεις εστιάζεται στο ότι ενώ στα πειραματόζωα έχουν επιβεβαιωμένες δυσμενείς επιδράσεις στην υγεία τους, στον άνθρωπο δεν είναι ακόμα ξεκάθαρο αν προκαλούν παρόμοιες επιδράσεις.
Αναπτύχθηκε μια μέθοδος με ικανοποιητικά χαρακτηριστικά όπως η υψηλή διαχωριστική ικανότητα, η ευαισθησία, η επιλεκτικότητα, η επαναληψιμότητα, η ακρίβεια, οι υψηλές ανακτήσεις, οι συγκεντρώσεις των τυφλών δειγμάτων κάτω από τα όρια ανίχνευσης, η ικανότητα ανάλυσης μεγάλου αριθμού δειγμάτων και ο σύντομος χρόνος ανάλυσης. Παρακολουθούνται έξι μεταβολίτες των φθαλικών εστέρων και τα όρια ανίχνευσης-ποσοτικοποίησης μεθόδου και οργάνου βρίσκονται στα χαμηλά ng/mL. Πραγματοποιήθηκαν δυο διεργαστηριακές συγκρίσεις της μεθόδου και τα αποτελέσματα ήταν πολύ ικανοποιητικά. Εφαρμόστηκε σε πραγματικά δείγματα για ανάλυση τόσο ελεύθερων (12 δείγματα) όσο και ολικών μεταβολιτών (24 δείγματα) και τα αποτελέσματα που μετρήθηκαν ήταν συγκρίσιμα με τη βιβλιογραφία.
Σκοπός της παρούσας μελέτης ήταν η ανάπτυξη και εφαρμογή μιας μεθόδου ποιοτικής και ποσοτικής ανάλυσης μεταβολιτών των φθαλικών εστέρων σε δείγματα ανθρώπινων ούρων με χρήση υγρής χρωματογραφίας υψηλής απόδοσης συζευγμένης με διαδοχική φασματομετρία μαζών με ηλεκτροψεκασμό (HPLC-ESI-MS/MS). Οι φθαλικοί διεστέρες χρησιμοποιούνται κυρίως σαν πλαστικοποιητές (πρόσθετα στα πλαστικά), βρίσκονται σε πάρα πολλά προϊόντα όπως και επίσης μέσω αυτών εκλύονται σε μεγάλες ποσότητες στο περιβάλλον.
Ο λόγος που αναπτύχθηκε αυτή η μέθοδος είναι η μελλοντική χρήση της, στην ανάλυση, για πρώτη φορά στην Ελλάδα και από τις πρώτες στην Ευρώπη, ενός μεγάλου αριθμού δειγμάτων ανθρώπινων ούρων και εύρεση των επιπέδων των μεταβολιτών των φθαλικών εστέρων. Αυτές οι ενώσεις μπορούν να χρησιμοποιηθούν ως βιοδείκτες (biomarkers) έκθεσης σε φθαλικούς εστέρες στην περιβαλλοντική επιδημιολογία. Το ενδιαφέρον σε αυτές τις ενώσεις εστιάζεται στο ότι ενώ στα πειραματόζωα έχουν επιβεβαιωμένες δυσμενείς επιδράσεις στην υγεία τους, στον άνθρωπο δεν είναι ακόμα ξεκάθαρο αν προκαλούν παρόμοιες επιδράσεις.
Αναπτύχθηκε μια μέθοδος με ικανοποιητικά χαρακτηριστικά όπως η υψηλή διαχωριστική ικανότητα, η ευαισθησία, η επιλεκτικότητα, η επαναληψιμότητα, η ακρίβεια, οι υψηλές ανακτήσεις, οι συγκεντρώσεις των τυφλών δειγμάτων κάτω από τα όρια ανίχνευσης, η ικανότητα ανάλυσης μεγάλου αριθμού δειγμάτων και ο σύντομος χρόνος ανάλυσης. Παρακολουθούνται έξι μεταβολίτες των φθαλικών εστέρων και τα όρια ανίχνευσης-ποσοτικοποίησης μεθόδου και οργάνου βρίσκονται στα χαμηλά ng/mL. Πραγματοποιήθηκαν δυο διεργαστηριακές συγκρίσεις της μεθόδου και τα αποτελέσματα ήταν πολύ ικανοποιητικά. Εφαρμόστηκε σε πραγματικά δείγματα για ανάλυση τόσο ελεύθερων (12 δείγματα) όσο και ολικών μεταβολιτών (24 δείγματα) και τα αποτελέσματα που μετρήθηκαν ήταν συγκρίσιμα με τη βιβλιογραφία.
|
Ανάπτυξη μεθόδου προσδιορισμού των μεταβολιτών των φθαλικών εστέρων στα ούρα με χρήση υγρής χρωματογραφίας-δίδυμης φασματομετρίας μάζας με ιονισμό ηλεκτροψεκασμού
